منصة الرسائل والاطاريح: تأثير بعض العوامل البيئية في نمو الفطرRhizoctonia solani وفعالية إنزيم البكتنيز

الخلاصة

نفذت سلسلة من التجارب تحت الظروف المختبرية لدراسة تأثير بعض العوامل البيئية مثل درجة الحرارة وتراكيز بعض الاملاح مثل NaCl وKH2PO4 وZnSO4 و ZnCl2 في نمو الفطر Rhizoctonia solani وتأثر بعض الظروف مثل مدة الحضن والرقم الهيدروجيني ودرجة الحرارة وتركيز البكتين وتأثير بعض الاملاح والتهوية اوفي قدرته على إنتاج أنزيم البكتينيز إضافة الى فعالية وثباتية هذا الأنزيم الذي يعد احد اهم عوامل الضراوة المساهمة في احداث الاصابة. أظهرت نتائج هذه الدراسة ان إضافة تراكيز محددة من أملاح NaCl وKH2PO4 وZnSO4 و ZnCl2للوسط الغذائي ((PDA كان لها تأثير متباين في نمو الفطر المذكور. إذ اختزلت معدلات النمو عند استخدام NaCl بنسبة 55% عند التركيز 0.4 ملي مول و75% عند التركيز 0.6 ملي مول وأصبح هذا الملح مثبطا للنمو بنسبة 100% عند التركيز 0.8 ملي مول خاصة في اليوم الثالث والرابع من التجربة. كما وصلت نسب التثبيط في نمو الفطر R. solani الى 57.5 ، 74.5 ، 100% عند التراكيز 0.4 ، 0.6 ، 0.8 ملي مول من KH2PO4 على التوالي في اليوم الرابع من الحضن. كذلك أوضحت النتائج وجود تأثير معنوي للفترة الزمنية طوال مدة التجربة. أما بالنسبة للملح ZnSO4 فلم يظهر أي انخفاض معنوي في معدلات النمو الا بعد التركيز 2.0 ملي مول وازداد التأثير التثبيطي مع ارتفاع تراكيز هذا الملح في الوسط الغذائي إذ انخفضت معدلات النمو فيها تقريبا إلى الثلث عند التركيز 4.0 ملي مول خاصة في اليوم الرابع من التجربة. ووصل مستوى التثبيط الى 100% عند التركيز 9.0 ملي. وفي المقابل فان ملح ZnCl2 لم يكن تأثيره واضحا في نمو الفطر R. solani ولمعظم التراكيز خلال فترة التجربة. تم التحري عن قابلية الفطر R. solani على انتاج انزيم البكتنيز تحت تأثير العوامل البيئية مثل مدة الحضن والرقم الهيدروجيني ودرجة الحرارة وتركيز البكتين وتأثير بعض الاملاح والتهوية. اذ أظهرت النتائج ان أعلى إنتاج لهذا لأنزيم كان في اليوم الثامن من الحضن عند تركيز 0.5 % بكتين باستخدام وسط انتاج الأنزيم (S&R)، إذ وصلت الفعالية الأنزيمية الى الذروة (0.26) وحدة/مل ثم انخفضت لتصل في اليوم التاسع والعاشر الى0.16 و0.08 على التوالي. كذلك فان الرقم الهيدروجيني 7 كان الأفضل لإنتاج الأنزيم بالمقارنة مع بقية المستويات في الاتجاهين الحامضي والقاعدي للرقم الهيدروجيني حيث وصلت الفعالية الأنزيمية الى 0.27 وحدة/ مل. كما لوحظ ان إنتاج الأنزيم كان في أقصاه بين الرقم الهيدروجيني (6-8). ووجد ان افضل درجة حرارة لإنتاج أنزيم البكتنيز هي 25 ْم، اذ بلغت عندها الفعالية الانزيمية 0.3 وحدة/ مل، ثم انخفضت الى 0.05 وحدة/مل عند درجة حرارة 35 ْم والى 0.016 وحدة/مل في درجة حرارة 40 ْم. كما أظهرت نتائج هذه الدراسة أهمية تركيز المصدر الكاربوني (البكتين) في إنتاج أنزيم البكتينيز، اذ بلغت الفعالية الأنزيمية 0.25 وحدة/ مل عندما كان تركيز البكتين في الوسط الأنزيمي 0.5% ، وعند ارتفاع التركيز الى 1% و1.5% انخفضت الفعالية الانزيمية الى 0.10 و0.08 وحدة/مل على التوالي. أما أهمية التهوية والمزج في إنتاج أنزيم البكتنيز فقد أظهرت النتائج ان الفعالية الأنزيمية باستخدام التهوية كانت 0.23 وحدة/ مل في اليوم الثامن من الحضن، في حين انخفضت تلك الفعالية بانعدام التهوية الى 0.15 وحدة/مل للفترة ذاتها من الحضن . ان استخدام 0.4 ملي مولار من ملح NaCl وKH2PO4 و ZnCl2كل على انفراد سبب تثبيطاً في انتاج الأنزيم بنسبة 14.9% و12.2 % و 7.5% على التوالي، بينما كانت نسبة التثبيط عند استخدام 4 ملي مولار من ZnSO4 هي18.6 %. كذلك أوضحت النتائج ان الرقم الهيدروجيني الأمثل لفعالية انزيم البكتنيز من فطر R.solani باستخدام ركيزة البكتين 0.5% هو 8 ، اذ بلغت الفعالية الأنزيمية عنده 0.25 وحدة/مل، كما ان افضل نشاط للانزيم يقع ضمن المدى المتعادل والقاعدي (7-8) اذ احتفظ الانزيم بـ 100% و87% من فعاليته الأصلية على التوالي، في حين انخفضت الفعالية الأنزيمية الى 60.8% و 52% على التوالي عند الرقم الهيدروجيني 9 و6. أما بالنسبة لتأثير درجة الحرارية في فعالية انزيم البكتنيز فقد بلغت أعلى قيمة للفعالية 0.25) وحدة / مل) عند 30 ْم ، ثم انخفضت مع ارتفاع أو انخفاض درجة الحرارة عن هذه الدرجة اذ ثبطت تماما عند درجة حرارة 50 ْم. بينما كان ثبات هذا الانزيم 100% عند درجات الحرارة 0-40 ْم اذ احتفظ الانزيم بنسبة 60% من ثباتيته عند درجة حرارة 50 ْم، في حين فقد الانزيم فعاليته تماماً عند درجة حرارة 60 ْم خلال مدة حضن 30 دقيقة. كما سببت محاليل الاملاح NaClو KH2PO4و ZnCl2 و ZnSO4 تثبيطاً لفعالية انزيم البكتنيز المنتج من قبل الفطر R. solani بنسب مختلفة، اذ حصل تثبيط بنسبة 22% و53% نتيجة استخدام 0.4 ملي مول من NaCl وKH2PO4 بينما سبب ZnCl2 (0.4 ملي مول) تثبيطا بنسبة 11% و 48% عند استخدام 4 ملي مولار من ZnSO4.