منصة الرسائل والاطاريح: التحری عن العنصر القافز - الأمبسلين فی Klebsiella pneumoniae

الخلاصة

تكون بكتريا Klebsiella pneumonae No. 10 غير مستقرة وراثياً وتمتلك بلازميد كبير منفرد غير اقتراني حجمه 120kbpيحتوى على جينات مقاومة الامبسلين والتتراسايكلين والستربتومايسين والكاناميسين والترايمثبرم والكلورامفينكول وحامض النالدكس وكذلك يشفر عن الصفة المخاطية في البكتريا. تم اشتقاق أربعة مجاميع من ضروب (K. pneumoniae I, K. pneumoniae G, K. pneumoniae K, K. pneumoniae L) من هذه العزلة بوساطة الزرع المتكرر في وسط M9 المزود بـ 150 مايكروغرام/مل من حامض السالسليك. تتباينت مجاميع ضروب بالنسق البلازميدي ونمط المقاومـة للمضادات الحيويـة مقارنة بالعزلة البريـة K. pneumonae No. 10. تكون ضرب K.pneumoniae I حساسة لترايمثبرم والسترتيومايسين والريفامبسين لذلك تم استعمالها كخلايا مستقبلة للبلازميد الاقتراني R751 غير المتوافق (Inc P). تمكن الامبسلين بتركيز 150 مايكروغرام/مل من حث عدم الاستقرار الوراثي للبكتريا K. pneumoniae I عند تكرار زرعها 540 جيل في وسط الامبسلين. ويتأثر الاستقرار الوراثي أيضاً بانخفاض درجة الحرارة (30ْم). وجد بأن العزلة تقاوم تراكيز عالية أكثر من 1000 مايكروغرام/مل من الامبسلين مقارنة بمضادات أخرى مثل الكلورامفينكول والتتراسايكلين والنوفوبايوسين والاموكسيلين. وتقترح هذه النتائج احتمال وجود عنصر قافز يشفر إلى مقاومة الامبسلين في هذه العزلة. تم حث العنصر القافز Tn::ِAp على الانتقال من البلازميد PKPI في خلايا المقترنة (K. pneumoniae TR1) (المحتوية على البلازميدين PKPI وR751) إلى البلازميد الاقتراني R751 بوساطة تكرار زرعها في وسط زرعي مزود بـ 150 مايكروغرام امبسلين وفي درجة حرارة 30 و 37ْم. أظهر الترحيل الكهربائي في هلام الاكاروز لمحتوى DNA للخلايا الناتجة من عملية الانتقال وجود حزم بلازميدية ذات حجم إضافي مقارنة بالبلازميد الأصلي R751 وأدنى من حجم البلازميد pKPI. وتقترح هذه النتائج احتمال حدوث انتقال العنصر القافز Ap-Tn من البلازميد pKPI إلى R751. تم الحصول على ثلاثة أنواع من الخلايا المقترنة E, coli TR2 و TR3 و TR4 بعد عملية الاقتران بين الخلايا الناتجة من عملية الانتقال والخلايا المستقبلة من بكتريا E. coli MM294 المقاومة للريفامبسين والخالية من البلازميدات. وأظهر الترحيل الكهربائي في هلام الاكاروز لمحتوى الـ DNA لأنواع الخلايا المقترنة بأنها تحتوي على البلازميد الاقتراني R751 ذو حجم إضافي مقارنة بحجم البلازميد الأصلي R751.تبين هذة النتائج احتمال احتواء البلازميد الاقترانى على العنصر القافز المشفر لامبسلين.