منصة الرسائل والاطاريح: دراسة خارج الجسم للتحقق من نشاط السبيرونولاكتون المضاد لتكاثر خط خلايا سرطان البروستات

الخلاصة

تم تنفيذ الجزء العملي لهذه الدراسة في مختبر أبحاث الدراسات العليا / فرع الأدوية والسموم / كلية الطب / جامعة بابل خلال الفترة من ديسمبر 2021 إلى أبريل 2022. يعد سرطان البروستاتا ثاني أكثر أنواع السرطانات شيوعًا والسبب الرئيسي الخامس للوفاة بالسرطان بين الرجال في جميع أنحاء العالم ، وبحسب تقدير عام 2018 فان هناك نحو 1276000 حالة سرطان جديدة و 359000 حالة وفاة في عام 2018. تم في هذه الدراسه اجراء خمسة تجارب مختبرية على خط خلايا البروستاتا السرطانية LNCaP حيث تم في التجربة الاولى تعريض الخلايا لكل من هرمون التستوستيرون و سبيرونولاكتون والعلاج الكيميائي الدوسيتاكسيل بشكل منفصل حيث تم استخدام التراكيز التالية (1000 ، 500 ، 250 ، 125 ، 62,5 و 31,25 مايكروغرام / مل) لكل مادة. وفي التجربة الثانية تم تعريض الخلايا الى مزيج من السبيرونولاكتون و التستوستيرون التي تحتوي على تركيز متساوٍ لكل مادة (500 + 500 ، 250 + 250 ، 125 +125 ، 62,5 + 62,5 ، 31,25 + 31,25 ، 15,625 + 15,625 مايكروغرام / مل). اما في التجربة الثالثة فقد تم تعريض الخلايا لمزيج من تركيز ثابت للدوسيتاكسيل)500 مايكروغرام / مل) مع سلسلة من التراكيز المخففة للسبايرونولاكتون (500 ، 250 ، 125 ، 62,5 ، 31,25 و 15,625 مايكروغرام / مل). وفي التجربة الرابعة تم تعريض الخلايا لمزيج من تركيز ثابت للسبايرونولاكتون) 500 مايكروغرام/مل) مع سلسلة من التراكيز المخففة للدوسيتاكسل (500 ، 250 ، 125 ، 62,5 ، 31,25 و 15,625 مايكروغرام / مل). واما في التجربة الخامسة فقد تم تعريض الخلايا لمزيج من التستوستيرون مع السبيرونولاكتون و دوسيتاكسيل بتراكيز متساوية لكل منهم حيث تم استخدام سلسلة من التراكيز المخففة لهذا المزيج (500 + 500 + 500 ، 250 + 250 + 250 ، 125 + 125 + 125 ، 62,5 + 62,5 + 62,5 ، 31,25 + 31,25 + 31,25 ، 15,625 + 15,625 + 15,625 مايكروغرام / مل). لقد تم قياس حيوية الخلايا في التجارب اعلاه عن طريق اختبارالسمية الخلوية التترازوليوم (MTT) والذي يعتمد على قياس شدة اللون بواسطة قارئ ELISA وتم ذلك بعد فترة حضانة 24 و 48 ساعة في التجارب الاربعة الاولى في حين تم حضن الخلايا لمدة 48 ساعة في التجربة الخامسة. حيث أظهرت نتائج الدراسة انخفاض عدد الخلايا الحية بشكل ملحوظ مع زيادة تركيز السبيرونولاكتون والتستوستيرون. لقد أظهرت النتائج أن التراكيز 1000،500،250،125 و 62,5 مايكروغرام / مل من التستوستيرون تسببت في حصول زيادة معنوية (P >0.05) في حيوية الخلايا LNCaP مقارنة بمجموعة السيطرة بعد 24 ساعة من الحضانة. اما بعد 48 ساعة من الحضانة أظهرت النتائج ان التراكيز 125 ، 62,5 و 31,25 مايكروغرام / مل تسببت في حصول زيادة غيرمهمة معنويأ (P˃0.05) في حيوية خلايا LNCaP ، بينما 250 مايكروغرام / مل تسبب في حصول انخفاضًا معنويًا (p < 0.05) في حيوية خلايا LNCaP ،اما التراكيز 500 و 1000 مايكروغرام / مل فقد سببا انخفاضًا معنويًا كبيرأ (p<0.001) في حيوية خلايا LNCaP عند مقارنته بمجموعة السيطرة. وكذلك أظهرت النتائج أن جميع تراكيز السبيرونولاكتون سبب في حصول زيادة غير مهمة معنويأ (p>0.05) في حيوية خلايا LNCaP مقارنة بمجموعة السيطرة بعد 24 ساعة من الحضانة. اما بعد 48 ساعة من الحضانة فان سبيرونولاكتون بتركيز 62,5 مايكروغرام / مل تسبب في حصول زيادة معنوية (P<0.05) في حيوية خلايا LNCaPبالمقارنة مع مجموعة السيطرة. بينما التراكيز 31,25 ، 125 و 1000 مايكروغرام / مل فقد سببت في حصول انخفاضأ معنويأ في حيوية هذه الخلايا. لم تظهر النتائج حصول فرق مهم إحصائيا في حيوية خلايا LNCaP بين مجموعتي السيطرة و تلك التي تعرضت للتركيز 250 مايكروغرام / مل بعد 48 ساعة من الحضانة. لقد بينت النتائج ان التركيز 250 مايكروغرام / مل من الدوسيتاكسيل تسببت في حصول انخفاضًا معنويًا (p<0.05) في حيوية خط خلايا LNCaP اما التراكيز 500 و 1000 مايكروغرام / مل فقد تسببت في حصول انخفاضًا معنويًا كبيرا(p<0.001) في خط خلايا LNCaP ، فيما لم يكن الفرق مهم إحصائيا (p>0.05) في حيوية خلايا LNCaP بين مجموعة السيطرة وكل من المجاميع التي تعرضت للتراكيز 31,25 ، 62,5 و 125 مايكروغرام / مل بعد 24 ساعة من الحضانة. أما بعد 48 ساعة من الحضانة فقد أظهرت النتائج أن جميع تراكيز الدوسيتاكسيل تسببت في حصول انخفاضًا معنويًا كبيرا(p<0.001) في حيوية خط خلايا LNCaP مقارنة بمجموعة السيطرة. اما عند تعريض خط خلايا LNCaP لمزيج مكون من تراكيز متساوية لكل من السبيرونولاكتون و التستوستيرون فقد أظهرت النتائج حصول انخفاضا معنويأ كبيرأ (P˂0.001) في حيوية هذه الخلايا عند تعريضها للتراكيز 31,25 ، 62,5 ، 500 و 1000 مايكروغرام / مل. في حين تسببت التراكيز 125 و 250 مايكروغرام / مل بحصول زيادة معنوية (P˃0.05) في حيوية هذه الخلايا بالمقارنة مع مجموعة السيطرة بعد فترة حضانة لمدة 24 ساعة. أما بعد 48 ساعة من الحضانة فقد بينت النتائج حصول انخفاض معنوي (P<0.05) في حيوية خط خلايا LNCaP بتركيز 31,25 مايكروغرام / مل وكان هناك انخفاض غير مهم معنويأ (p>0.05) في حيوية الخلايا عند التركيز 500 مايكروغرام / مل بالمقارنة مع مجموعة السيطرة. اما عند تعريض خط خلايا LNCaP لمزيج مكون من تراكيز مختلفة من السبيرونولاكتون مع تركيز ثابت للدوستاكسل( 500 مايكروغرام/مل) فقد أظهرت النتائج أن تراكيز المزيج 500 + 125 ، 500 + 250 و 500 + 500 مايكروغرام / مل قد تسببت في حصول زيادة معنوية (P <0.05) في حيوية خط خلايا LNCaP , في حين أن تراكيز المزيج 500 + 15,625 ، 500 + 31,25 و 500 + 62,5 مايكروغرام / مل لم تتسبب في حصول فروقات مهمة إحصائيا في حيوية خط خلايا LNCaP بالمقارنة مع مجموعة السيطرة بعد مدة حضانة 24 ساعة. فيما أظهرت النتائج أن جميع تراكيز المزيج أعلاه قد تسببت في حصول انخفاضًا معنويًا كبيرا ( p<0.001) في حيوية خط خلايا LNCaP مقارنة بمجموعة السيطرة بعد 48 ساعة من الحضانة. اما عند تعريض خط خلايا LNCaPلمزيج مكون من تراكيز مختلفة من الدوسيتاكسل مع تركيز ثابت من السبيرونولاكتون (500 مايكروغرام/مل) فقد أظهرت النتائج أن التركيز 31,25500+ مايكروغرام / مل فقد تسبب في حصول زيادة غير معنوية (P˃0.05) في حيوية خط خلايا LNCaP ، بينما التركيز 15,625+500 مايكروغرام / مل فقد تسبب في حصول نقص غيرمهم معنويأ (P˃0.05) في حيوية خلايا LNCaP. في حين أن تراكيز المزيج 62,5 +500 ، 125 +500 و 250+500مايكروغرام / مل قد تسببت في حصول انخفاضًا معنويًا (P <0.05) في حيوية خط خلايا اما التركيز 500 + 500 مايكروغرام/مل فقد تسبب في حصول انخفاضأ معنويأ كبيرا (p˂0.001) في حيوية هذه الخلايا مقارنة بمجموعة السيطرة بعد 24 ساعة من الحضانة. أظهرت النتائج أيضًا ان جميع تراكيز المزيج أعلاه وبعد فترة حضانة 48 ساعة قد تسببت في حصول انخفاضا معنويا كبيرا (P <0.001) في حيوية خط خلايا LNCaPمقارنة بمجموعة السيطرة. فيما يخص تعريض خط خلايا LNCaP لعدة تراكيز من مزيج يحتوي كل منها على تركيز متساوي لكل من التستوستيرون ,السبايرونولاكتون والدوسيتاكسل وبعد مدة حضانة 48 ساعة وبالمقارنة مع مجموعة السيطرة فقد بينت النتائج أن المزيج المكون من التركيز 62,5 و125 مايكروغرام/ مل والمزيج المكون من التركيز 250 و 500 ميكروغرام / مل لكل مكون من المكونات أعلاه قد تسببت في حصول انخفاضا معنويا (P˂0.05) وانخفاضا معنويا كبيرا(p<0.001) على التوالي في حيوية خط خلايا LNCaP وقد كان التأثير الأكثر سمية على هذه الخلايا هو للمزيج الحاوي على التركيز500 مايكروغرام / مل من كل مكون. أما فيما يخص تاثير المزيج المكون من التركيز 15,625 و 31,25 مايكروغرام / مل فقد أظهرت النتائج حصول انخفاض غير مهم إحصائيا (p>0.05) في حيوية هذه الخلايا. يستنتج من نتائج الدراسة الحالية أن للتراكيز العالية من التستوستيرون (وبعد فترة حضانة 48 ساعة) والسبايرونولاكتون تأثيرا مثبطا لحيوية خط خلايا سرطان البروستات LNCaP وللتراكيز العالية من الدوسيتاكسيل بعد فترة حضانة 24 ساعة وجميع تراكيزه بعد فترة حضانة 48 ساعة على التوالي تأثيرا مثبطا لحيوية خط خلايا سرطان البروستات.LNCaP وان لمزيج كل من السبايرونولاكتون مع التستوستيرون و السبايرونولاكتون (بعدة تراكيز) مع الدوسيتاكسل (تركيزثابت) و الدوسيتاكسل (بعدة تراكيز) مع السبايرونولاكتون (تركيزثابت) تأثيرا مثبطا لحيوية خط خلايا سرطان البروستات .LNCaP وأيضا لمزيج التستوستيرون ,السبايرونولاكتون والدوسيتاكسل تأثيرا مثبطا لحيوية خط خلايا سرطان البروستات LNCaP والتاثير الافضل كان للمزيج ذو التركيز500 مايكروغرام/مل لكل منهم .