منصة الرسائل والاطاريح: تأثيرالاصابة بطفيليLeishmania donovani في مختلف المعايير المناعية والدمية : دراسة مختبرية على الفئران البيض

الخلاصة

داء الليشمانيا مرض استوائي مهمل يسببه طفيليات أولية داخل الخلايا. وهو متوطن في 98 دولة حول العالم. هذه الطفيليات لها دورة حياة معقدة تتضمن مضيفًا فقاريًا حساسًا وناقلًا حشريًا ملائمًا لنقل العدوى . تؤثر تفاعلات الطفيلي مع الجهاز المناعي للمضيف على أعراض داء الليشمانيا . في هذه الدراسة قمنا بإعداد وسط خاص لعزل طفيلي الليشمانيا في المختبر، وقمنا بدراسة اصابة الفئران بروماستيجوالليشمانيا دونوفاني ثم تحقيق في التغيرات المحتملة والارتباطات بينها، على سبيل المثال، المعايير الدموية، وإنزيمات مضادات الاكسدة وكذلك مستويات السيتوكين.عينات هذه الدراسة هي 70 فأرًا من الذكور والإناث مقسمة إلى 35 مصابة بروماستيجوت Leishmania donovani 1*107 و35 مجموعة تحكم. في هذه الدراسة، أنشأنا نموذج تحدي بروماستيجوت L.donovani باستخدام الفئران البيضاء كمواضيع تجريبية. لتقييم تأثير هذا النموذج على المعايير الدموية، اخترنا عدة مؤشرات قياسية تشمل WBCs، LYMs، RBCs، HCT، Hb، PLTs، MCV، MCH، و MCHC للتحليل الدموي. أظهرت النتائج تباينًا كبيرًا خاصة في WBC، GRA%، GRA، MON و LYM (0.001**، 0.0001**، 0.0001**، 0.016* و 0.001**) على التوالي للفئران المصابة بـ Leishmania donovani مقارنةً بالفئران السليمة. كما لوحظ زيادة في مستويات HGB و HCT و (PLT) في الفئران المصابة (0.033*، 0.046* و 0.02* على التوالي) مقارنةً بالفئران السليمة، وأظهرت معاملات الارتباط بين المعايير الدموية في الفئران المصابة بـ L. donovani وجود ارتباطات متنوعة بين معايير الدم. كما لاحظنا في الدراسة الحالية إن الزيادة الهامشية في متوسط وزن الجسم تفتقر إلى الدلالة الإحصائية، مما يشير إلى ثبات وزن الجسم ضمن الظروف المحددة. بينما تؤدي العدوى بـ L. donovani إلى انخفاض كبير في وزن الجسم، كما هو موضح بواسطة قيمة p التي تساوي **0.001. ايضا في هذه الدراسة عند قياس إنزيمات مضادات الأكسدة SOD وGPx في مصل الدم وأنسجة الكبد، تبين أن العدوى بـ L. donovani تؤدي إلى زيادة كبيرة في مستويات GPx و SOD في مصل الدم (*0.013، *0.033على التوالي) وفي الأنسجة الكبد (*0.006، **0.001 على التوالي)، مما يشير إلى زيادة كبيرة في المستويات في كل من مصل الدم وأنسجة الكبد الفئران. يدل ذلك على استجابة متزايدة للإجهاد التأكسدي أو نشاط مضاد للأكسدة في الفئران المصابة مقارنة بمجموعة التحكم.وأظهرت نتائج هذه الدراسة أن هناك زيادة في تركيز GPx و SOD في مصل الدم والكبد لدى الفئران المصابة. تعكس هذه الزيادة في مستويات GPx و SOD في كل من المصل والأنسجة استجابة واسعة وفعالة لمضادات الأكسدة، مما يساهم في حماية الأعضاء المختلفة من التلف التأكسدي.قدرة الطفيلي على تعديل استجابة الجهاز المناعي للمضيف والتداخل مع نظام مضادات الأكسدة تساهم في الإجهاد التأكسدي وعمليات بيروكسيد الدهون؛ هذه الاختلالات يمكن أن تكون لها آثار على تطور داء الليشمانيات الحشوي وقد تؤثر على مآل المرض. شملت الدراسة أيضًا تحليل تأثير العدوى على إفراز السيتوكينات من الخلايا المناعية. وأظهرت النتائج اختلاف مستويات إفراز السيتوكينات المهمة في الدم والكبد لدى الفئران، مثل IL-10 وTNF-α. لوحظت زيادة في مستويات IL-10 (*0.028)في الدم وانخفاض في مستوياته في الكبد(*0.039) مقارنة بمجموعة التحكم. يشير ذلك إلى وجود تثبيط محدد للاستجابة المضادة للالتهابات في أنسجة الفئران المصابة أثناء الإصابة بـ L. donovani. أما بالنسبة (TNF-α)، فإن مستوياته قد تظهر ديناميكيات معقدة خلال العدوى، مع حدوث تباينات في الأنسجة المختلفة وفي مراحل مختلفة من العدوى. وأظهرت النتائج انخفاضًا في تركيز TNF-α (**0.001)في الدم وفي أنسجة الكبد(*0.029) لدى الفئران المصابة مقارنة بمجموعة التحكم. بشكل عام، تشير الدراسة إلى أن داء الليشمانيات الحشوي يعمل على تثبيط استجابة الجهاز المناعي. استخدمت الدراسة الحالية برنامج موت الخلايا المبرمج (Caspase-3) يُعتبر Caspase-3 إنزيماً رئيسياً متورطاً في عملية الاستماتة أو موت الخلايا المبرمج. في سياق العدوى بـ L.donovani، يمكن أن تختلف ديناميكيات مستويات Caspase-3 بناءً على مرحلة العدوى، النسيج المصاب، واستجابة الجهاز المناعي للمضيف بعد شهرين. لم تظهر المجموعة المصاب انخفاضًا ذا دلالة إحصائية في مستويات Caspase-3 (0.073)في مجرى الدم، مما يشير إلى أن العدوى لا تؤثر بشكل كبير على مستويات Caspase-3 في الدم. بينما أظهرتالمجموعة المصاب ارتفاعًا ذا دلالة إحصائية في مستويات Caspase-3 (*0.046) في الأنسجة، مما يدل على زيادة النشاط الاستماتي في أنسجة الفئران المصابة.. في الدراسة الحالية، قمنا بدراسة الحساسية والنوعية للتنبؤ بمرض L. donovani في الفئران باستخدام مجموعة من المؤشرات. أظهرت تحليلات الأنسجة الكبد لـ Caspase-3 حساسية عالية ونوعية معتدلة، بالإضافة إلى قيمة AUC جيدة وقيمة p ذات دلالة إحصائية، مما يجعلها المؤشر الأكثر وعدًا. أما بالنسبة لـ IL-10 و TNF-α في الأنسجة، فقد أظهرت مستويات حساسية عالية، ولكن نوعيتها كانت ضعيفة وقيم AUC منخفضة، مما يحد من فائدتها التشخيصية رغم القيم الكبيرة لـ p. أداء المؤشرات التشخيصية لـ Caspase-3 و IL-10 و TNF-α في الدم كان غير مرضٍ، حيث أظهرت قيم AUC منخفضة وقيم p غير دالة إحصائيًا أو مضللة. وتشير النتائج إلى أن قياسات الأنسجة، وخاصة لـ Caspase-3، تمثل طريقة أكثر موثوقية لتحديد عدوى L.donovani في الفئران مقارنةً بالبيانات المستخلصة من الدم.