منصة الرسائل والاطاريح: انتشار نظام الافراز الاول (Apr DEF) وانزيم البروتييز القاعدي (AprA) في عزلات الزوائف الزنجارية المعزولة من اصابات الحروق .

الخلاصة

تعد بكتريا الزائفة الزنجارية السالبة لصبغة جرام من اهم مسببات الامراض الانتهازية حيث تسبب العديد من الالتهابات الحادة والمزمنة مع ارتفاع معدلات الاعتلال والوفيات. تم تصميم هذه الدراسة كدراسة مقطعية في المرضى الذين يعانون من عدوى Pseudomonas aeruginosa. تم عزل حوالي 27 عزلة من Pseudomonas aeruginosa من 70 عينة من مرضى الحروق خلال الفترة () و 62 عزلة من النوع P. aeruginosa نقية معزولة سابقاً من مرضى الحروق، وتم جمع هذه العينات من مستشفى الحلة التعليمي ومستشفى الإمام صادق التعليمي في محافظة بابل خلال 2020_2021 أظهر اختبار الحساسية للمضادات الحياتية ان النسبة الأعلى للمقاومة للمضادات كانت بنسبة (58.42٪) للمضاد الحيوي الأميكاسين (AK) وكانت متوسطة المقاومة للمضاد الحيوي للبيبراسيلين (PRL) بنسبة (23.60٪) ، بينما ظهرت أعلى نسبة حساسية للمضاد الحيوي الميروبينيم (MEM) بنسبة (47.19٪) , بالإضافة الى ان معظم عزلات بكتريا الزائفة الزنجارية كانت متعددة المقاومة للمضادات بنسبة 23.6٪ , في حين ان نسبة 21.34٪ من العزلات كانت حساسة لجميع المضادات الحيوية. أظهرت الدراسة الحالية أن حوالي 11 عزلة بنسبة (12.36٪) اظهرت مستوى عالٍ من إنتاج انزيم البروتييز بمعدل (3-3.9) ،و 39 عزلة اخرى بنسبة (43.82٪) كانت ذات معدل متوسط في انتاج الانزيم بمعدل (2-2.9) و 29 عزلة بنسبة (32.58٪). ) منخفضة الانتاج للانزيم بمعدل (1-1.9) , في حين 10 عزلات اخرى بنسبة (11.244%) لم تظهر أي انتاج للانزيم اعتمادا على التشخيص المظهري الوراثي لعزلات بكتريا P. aeruginosa ان عزلة البكتريا نمط (P. aeruginosa 13- NR2) لها القدرة على انتاج انزيم البروتييز القاعدي بمستوى عالي مما يجعلها مقاومه بشكل كبير للمضادات الحيوية , بينما أظهر P. aeruginosa 18_GF انتاج متوسطً من انزيم البروتييز الخارج خلوي وحساسًا للمضادات الحيوية . حيث ان كلا النمطين كانا يملكان مجموعة جينية كاملة aprA والتي تشفر إلى البروتييز القاعدي (AprA) ومثبط البروتييز القاعدي (AprI) والنظام الإفرازي من النوع الأول (TISS). أظهر اختبار التسلسل الجيني (sequence) للعينات التي اجري لها اختبار البلمرة المتسلسل لجينات البروتييز القاعدي من نوع aprA P. aeruginosa 13- NR2 و P. aeruginosa 61- كان لدى NR1 طفرة استبدال (C> T) في منطقة aprA المدروسة في الموضع 60 و P. aeruginosa 18- GF كان لديه طفرة استبدال (A> G) في المواضع 174 ، اما بالنسبة لجين aprI ، ظهرت ثلاث طفرات استبدال في P. aeruginosa 13- NR2 تشمل (A> C و C> A و C> A) في المواضع 101 و 123 و 141 على التوالي. بالإضافة إلى ذلك ظهرت جينات النظام الإفرازي من النوع الأول لـ aprD و aprF لـ P. aeruginosa 18-GF و 13-NR2 و 61-NR1 تسلسلات متطابقة مع متواليات من تلك المتوفرة في بنك الجينات (NCBI) ،في حين كان لعزلaeruginosa 60-ZR p. أظهر تحوران ، الحذف الأول (C) في الموضع 30 وطفرة الاستبدال C> A)) في الموضع 139 ، أخيرًا ظهر جين aprE للعزلات المحلية P. aeruginosa 18-GF و 13-NR2 طفرة استبدال واحدة (G> C) في الموضع 111 مقارنة بتسلسلات الجينات المتوفرة في بنك الجينات (NCBI). أظهرت نتائج التحليل الجيني لجين toxA وجود تضخم عند الوزن الجزيئي (150 زوج قاعدة) ، حيث وجد هذا الجين في حوالي 95.5٪ من عزلات P. aeruginosa ، حيث كانت 17 (89.47٪) حساسة للمضادات الحيوية ، 34 (94.45٪) متعددة المقاومة للمضادات الحيوية. تم اختيار ثلاث عزلات من P. aeruginosa عشوائياً من ثلاث مجموعات ، MDR P. aeruginosa 13-NR2 و Non-MDR P. aeruginosa 61-NR1 و P. aeruginosa 18-GF الحساسة لمزيد من التحليل باستخدام تقنية تسلسل PCR-DNA. أظهرت النتائج أن الجين toxA لعزلة MDR P. aeruginosa 13-NR2 له طفرة إحلال واحدة C> T في الموضع 60.