منصة الرسائل والاطاريح: تقييم جينات الضراوة في المكورات العنقودية الذهبية المعزولة من المرضى المصابين بالتهاب العيون

الخلاصة

تعد المكورات العنقودية الذهبية من أكثر مسببات الأمراض شيوعًا التي تسبب العدوى البكتيرية للعين. يمكن أن تسبب تلف التركيب التشريحي للعين على مستويات متعددة. يشمل (الملتحمة والقرنية والجفون والجهاز الدمعي والصلبة والشبكية) مع احتمال العمى. حيث انها قادرة على إنتاج العديد من عوامل الضراوة التي تساعد على الاصابة عن طريق الالتصاق وغزو الأنسجة والتهرب من الاستجابة المناعية للمضيف. الهدف الرئيسي لهذه الدراسة هو عزل وتشخيص المكورات العنقودية الذهبية من التهابات العيون البكتيرية والتحقق من وجود بعض جينات الضراوة جزيئا وعلاقتها بالإصابة. أذ تضمنت الدراسة جمع مسحات العين من (160) مريض من المرضى المراجعين لاستشارية العيون في المستشفيات، بما في ذلك مستشفى ابن الهيثم التعليمي للعيون/ في محافظة بغداد ومستشفى الامام الصادق ومستشفى الحلة التعليمي / في محافظة بابل بعد تشخيصهم سريريا من قبل الطبيب الاستشاري والذين كانوا يعانون من إصابات بكتيرية للأجزاء الخارجية في العين (الملتحمة والجفون وكيس الدمع) تتراوح أعمارهم بين ( 74-4سنة) لكلا الجنسين للفترة (من تشرين الثاني 2021 الى اذار2022 ) ، بينت نتائج هذه الدراسة ارتفاع نسبة الإصابة لدى الذكور أذ بلغت %71 عنه في الاناث حيث كانت نسبة الإصابة %29 ، كما ظهر ان معدل التهاب ملتحمة العين هو الأعلى (%75) تلاه معدل التهاب الاجفان (%20)، التهاب القرنية (%4) واخيرا جاء معدل التهاب كيس الدمع (%1). زرعت جميع العينات على أوساط زرعيه مختلفة، حضنت هوائيًا عند درجة حرارة 37درجة مئوية لـ (48-24) ساعة. ولقد أظهرت نتائج الزرع أن 139(%87) عينة أعطت نمو بكتيري إيجابي، بينما 21(%13) عينة لم يكن لها نمو بكتيري. ومن مجموع 139عينة زرع موجبة فقط 57عزلة كانت تعود لبكتريا المكورات العنقودية الذهبية بنسبة (%41.07) وقد تم تشخيصها حسب الطرق القياسية لتشخيص البكتريا مظهريا ومجهريا وكيموحيويا وكذلك باستخدام نظام Vitek 2 compact system. استخدم وسط MRSA Chromogenic Agar Base للكشف عن المكورات العنقودية الذهبية المقاومة للميثيسيلين. تم تأكيد نتائج العزلات البكتيرية عن طريق اختبار حساسية المضاد الحيوي سيفوكسيتين، والذي كان بنسبة %100 مقاومة كاملة للسيفوكسيتين لتحديد مقاومة الميثيسيلين. أظهرت نتائج دراستنا أن جميع العزلات كانت مقاومة للميثيسيلين. كذلك فحصت حساسية البكتريا للمضادات الحيوية بواسطة طريقة كيربي بور على طبق مولر هنتون حيث استخدم 18مضادا حيويا ( سيفوكستين و كليندامايسين و سيبروفلوكساسين و الكلورامفينيكول و دوكسيسيكلين و الاريثروميسين و جاتيفلوكساسين و ليفوفلوكساسين و لينزوليد و نتروفورانتوين و نورفلوكساسين و أوكساسيلين و أوفلوكساسين و بنسيلين جي و ريفامبين و تريميثوبريم و فانكومايسين ) أظهرت نتائج فحص الحساسية للمضادات الحيوية أعلى مقاومة بين المضادات الحيوية عند معدل المقاومة (%100) الى سيفوكستين ،(%96.49) إلى بنسيلين جي ،(%94.73) إلى أوكساسيلين بينما توجد أقل معدلات مقاومة مع نتروفورانتوين بنسبة (%1.75)، (%3.5) الى كل من فانكومايسين و لينزوليد ،(%8.77) للريفامبين والكلورامفينيكول و جاتيفلوكساسين، أظهرت النسبة المئوية لمقاومة المضادات الحيوية للعزلات ان 45 (%79) عزلة متعدد المقاومة للأدوية والتي عادة ما ترتبط بالمكورات العنقودية المقاومة للميثيسيلين. كما تضمنت الدراسة الكشف عن اختبار تكوين الأغشية الحيوية باستخدام طريقة لوحة زراعة الأنسجة tissue culture plate method (TCP)، وأظهرت النتائج أن 43عزلة (%75) لديها القدرة على إنتاج الأغشية الحيوية. تم استخدام تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR)لتأكيد العزلات عن طريق تضخيم البرايمر المحدد لجين 16SrRNA الخاص بالمكورات العنقودية الذهبية، جميع العزلات أعطت نتيجة موجبة لهذا الجين. أيضا تم استخدام تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل(PCR) لتحديد بعض الجينات المسؤولة عن ضراوة البكتيريا المعزولة. تم الكشف عن قابلية البكتريا لإنتاج السموم المعوية وفقًا لخمسة جينات معوية كلاسيكية Sea, Seb, Sec,) Sed، (See وجد أن 50 عزلة من المكورات العنقودية الذهبية (%88) تحتوي على جين أو أكثر من الجينات المعوية. كان جين Seb هو الجين الأكثر شيوعًا لترميز الذيفان المعوي من بين الجينات الأخرى التي تم اختبارها بنسبة (%75) من الجينات المعوية المكتشفة يليه الجين Sec الذي شكل (%67)، ثم الجين Sed بنسبة (%61) وجين Sea بنسبة (%42) بينما كان See بنسبة. (%32) أظهرت النتائج المتحصل عليها من هذه الدراسة أن 6(%10) من عزلات المكورات العنقودية تحتوي على جين واحد فقط للسموم المعوية، في حين أن 7 (%12) من العزلات تمتلك جينين معظمهما Seb و16 عزلة من المكورات العنقودية (%28) تحتوي على ثلاثة جينات مشفرة للسموم، 15عزلة (%26) تحتوي على أربعة جينات مشفرة للسموم، و6 عزلات من المكورات العنقودية (%11) تحتوي على خمسة جينات مشفرة للسموم. أستخدم نوعين من الجينات للكشف عن مقاومة البكتريا للمضادات الحيوية وهما جين erm B أحد الجينات المسؤولة عن مقاومة البكتريا لمضاد الارثروميسين وجين tet M المشفر لمقاومة مضادات التتراسايكلين وأظهرت النتائج أن نسبة الجينات في العزلات (%68) لـ erm B و (%19) لـ tet M بينما ظهرت نتيجة الكشف عن النمط الجيني في بكتريا المكورات الذهبية لتشكل الغشاء الحيوي بنسبة عالية وفقا لنتائج تفاعل البلمرة المتسلسل لـ 57عزلة لوحظ وجود جين Wzm في39 عزلة بنسبة (%68) وكانت النتيجة مقاربة لنتيجة اختبار تكوين الأغشية الحيوية باستخدام طريقة لوحة زراعة الأنسجة (TCP).