المايكوبلازما كائنات حية بطيئة النمو تفتقر الى جدار خلوي و تعزل في الغالب من المسالك البولية التناسلية . على الرغم من ان العديد من انواع المايكوبلازما تعتبر فلورا طبيعة , الا ان بعض الانواع تسبب امراضا خطيرة في الجهاز التناسلي .
تهدف الدراسة الحالية الى تحديد العلاقة بين العدوى الميكروبية شديدة الحساسية (انواع المايكوبلازما و اليوريابلازما ) و بعض المعايير المناعية لعدوى المسالك البولية التناسلية لدى النساء المتزوجات فقط (حوامل - غير حوامل ) و لتحقيق هذا الهدف و للحصول على نتائج موثقة , تم تطبيق تقنيات هي طريقة الزرع و فحص تفاعل سلسلة البلمرة , للتحقق في مسببات الامراض الميكروبية .
شملت هذه الدراسة جمع 223 عينه (123 من النساء الحوامل و 100 من النساء غير حوامل ), ( ادرار + دم ) من مرضى المسالك البولية التناسلية ( حسب التشخيص المختبري الاولي من قبل وحده الطفيليات لجميع المرضى قيد الدراسة ) , التي وصلت الى مستشفى الولادة و الاطفال في بابل والعيادات الخاصة في محافظة بابل, خلال ستة اشهر ( من كانون الثاني الى حزيران , 2021). العينات التي جمعت من المرضى تشمل كمية من مصل الدم (للاختبارات المناعية) و كمية من الادار قسم الى انبوبين , الاول للفحص البكتيري و الانبوب الثاني للاختبارات المناعية . بالاضافة ال 20 عينة ( ادار و مصل الدم) جمعت من النساء المتزوجات السليمات كمجموعة سيطرة (10 حوامل + 10 غير حوامل) . تم توزيع عينات المرضى الى ثلاث مجموعات حسب الفئات العمرية (20-29) سنة 103 (46.19%) مريض , فقط 36 حالة موجبة للزرع المايكوبلازما ( 26حامل و 10 غير حامل), (30-39) سنة 72 (29,32%) مريض , فقط 21 حالة موجبة للزرع المايكوبلازما (12 حامل و 9 غير حامل) و (40-49) سنة 48 (52,21%) مريض , فقط 13 حالة موجبة للزرع المايكوبلازما (2 حامل و 11 غير حامل) .
تم تحديد العزلات وفقاً لأوساط زرعيه عادية للتحقق في مسببات الامراض الشائعة و اوساط زرعيه أغنائية للتحقق في مسببات الامراض بطيئة النمو وثم التأكيد بواسطة تفاعل سلسلة البلمره .
عزلت و شخصت بكتريا ( Mycoplasma genitalium , Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum ) على اوساط اغنائية انتقائية زرعية ( (MAU- mediumفضلا" عن بعض الاختبارات الكيموحيوية و تفاعل سلسلة البلمرة , ( PCR assay ) كما اختبرت الحساسية الدوائية للمضادات الحيوية تجاه تلك العينات .
أظهرت النتائج ان نسبة عزل بكتريا المايكوبلازما لـ 123 عينه من النساء الحوامل كانت 40 (5,32%) شملت M. genitalium, U. urealyticum , M. hominis , ونمو مختلط , 25(20.3%) و 2(1.6) و 9(7.3%) و 4(3.3%) , على التوالي . فيما كانت نسبة العزل لغير الحوامل 30(30%) شملت , M. hominis , M. genitalium U. urealyticum و نمو مختلط , 19(19%) , 3(3%) , 4(4%) ,4(4%) , على التوالي . كانت النسبة المئوية في الريف اعلى عن الحضر في كل من النساء الحوامل و النساء غير الحوامل حيث بلغت 28/40 (76,22%) و 16/30 (16%) , على التوالي .
كان أجمالي معدل الاصابة بالمسالك البولية التناسلية التي تسببها M. genitalium اعلى معنويا 44/70 (73,19%) , بينما معدل الاصابة بـ U. urealyticum , M. hominis و نمو مختلط و التي شكلت 13/70 (83,5%) , 5/70(24,2%) و 8/70 (59,3%) , على التوالي .
علاوة على ذلك , أشارت النتائج الى ان الاصابة بـالمايكوبلازما التناسلية كانت مرتبطة مع العمر حيث ان الفئة العمرية (20-29) نسبتها 36(14,16%) اعلى نسبة ايجابية للزرع , تلتها الفئة العمرية (30-39) نسبتها 21(42,9%) و اخيرا الفئة العمرية (40-49) نسبتها 13(83,5%) .
فيما يتعلق باستخدام اختبار PCR , أوضحت النتائج ان 37/70 (59,16%) , 20/70 (97,8%) و 13/70 (83,5%) , من العينات المختبرة كانت ايجابية لــ M. genitalium , M. hominis و U. urealyticum , على التوالي .
تم فحص النتائج الحالية لمجموعة النيوكليوتيدات و تأكيدها بأستخدام جين 16S rRNA معلومات قواعد بيانات تسلسل M.gentialium المسجلة في البنك الجيني . أظهرت النتائج ان تحديد التسلسل يتراوح من 72% الى 84% تم الحصول عليها لــ (7) عزلات من اصل (11) عزلة محاذاة مع عزلات مرجعية متقاعدة في قاعدة بيانات البنك في المركز الوطني للمعلومات التكنولوجيا الحيوية . ارتبط التسلسل المحلي لــ M.genitalium رقم 6 ارتباطا وثيقا بالتسلسل MZ379495.1لــ Mycoplasma genitalium strain MIMQ1 (العراق) وبالقرب من تسلسل MZ379496.1لــ Mycoplasma genitalium strain MIMQ2 (العراق) و تسلسل NR 026155.1لــ Mycoplasma genitalium strain G37 ATCCL43967.2 .
شجرة النشوء و التطور للتسلسل الجزئي عملت باستخدام 7 عزلات من هذه الدراسة مع تسلسلات مرجعية مماثلة في البنك الجيني للعثور على درجات تحديد الجينات و التشابه و مقارنتها بعزلاتنا .
تم استخدم اختبار الحساسة لجميع العزلات ضد 8 من المضادات الحيوية , و اظهرت النتائج في هذه الدراسة كانت عزلات M.genitalium , M.hominis و U. urealyticum حساسة تماما (100%) لمضادات Ofloxacin , Doxycycline و Clindamycin .
كما كانت جمع عزلات M. hominis و U. urealyticum حساسة تماما (100%) لـ Ciprofloxacin , لكن عزلات M. genitalium كانت حساسة بنسبة (3,77%) لـ Ciprofloxacin .
أظهرت النتائج ان 100% من عزلات الـ U. urealyticum مقاومة لـ Erythromycin . من ناحية اخرى , كانت عزلات M. hominis مقاومة تماما (100%) لـ Erythromycin and Azithromycin .
نتائج الفحص المناعي لبعض المعايير المناعية اجريت باستخدام تقنية الاليزا (ELISA) لقياس تركيز انترلوكين 18 و TLR-6 و انترفيرون بيتا جهازيا و موضعيا .
انترلوكين 18 هو سايتوكين له خصائص محفزة للالتهابات . قياس تركيز انترلوكين 18 لإدرار المرضى (39,13±3,3) اظهر وجود زيادة معنوية مقارنة بالسيطرة (63,10±1,2) , بينما قياس تركيز انترلوكين 18 في مصل المرضى (01,12±8,9) تبين عدم وجود فرق معنوي مقارنة بمجموعة السيطرة (22,9±4,2) .
من ناحية اخرى TLR-6 هو بروتين متغاير له خصائص ذاتية للالتهابات . قياس TLR-6 لإدرار المرضى (08,2±3,0) لوحظ وجود فرق معنوي مقارنة بالسيطرة (70,1±4,0), بينما قياس مستقبل شبيه بالرسم 6 في مصل المرضى (21,2±4,1) لم يظهر زيادة معنوية مقارنة مع مجموعة السيطرة (80,1±5,0) .
كذلك انترفيرون بيتا هو سايتوكين له خصائص محفزة للالتهابات و مضادة لالتهابات . قياس تركيز انترفيرون بيتا لإدرار المرضى (89,269±1,66) اظهر وجود زيادة معنوية مقارنة بالسيطرة (22,210±3,69) , و قياس تركيز انترفيرون بيتا في مصل المرضى (56,230±5,91) تبين وجود فرق معنوي مقارنة بالسيطرة (38,174±2,36) .
في ضوء النتائج التي قدمتها الدراسة نستنتج ان تقنية الـ PCR هي الطريقة الاكثر فعالية و دقة و مفيدة للكشف عن انواع المايكوبلازما و اليوريابلازما المسببة لالتهابات البولية التناسلية عند النساء المتزوجات , وايضا اثبتت تأثر الجهاز المناعي للمرضى نتيجة للإصابات البكتيرية موضعيا و جهازيا .