منصة الرسائل والاطاريح: دراسة مناعية وجزيئية لتعدد اشكال النيوكليوتيدات المفردة لبعض الجينات المرتبطة بالمرضى المصابين بكوفيد-19 في محافظة بابل

الخلاصة

فيروسات كورونا هي مجموعة من فيروسات الحمض النووي الرايبوزي والتي تسبب الأمراض للإنسان والفقاريات. يمكنها ايصال المرض إلى الجهاز التنفسي والجهاز الهضمي والكبد والجهاز العصبي المركزي للإنسان وهي فيروسات مغلفة تمتلك جينوم الحمض النووي الرايبوزي ذات الإحساس الإيجابي أحادية السلسلة. يمكن لهذا الفيروس أن يدخل جسم الإنسان عن طريق مستقبلات الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 الموجودة في الأعضاء المختلفة والتي تكون مكملة لشكل السنبلة مما يسمح بحدوث ارتباط ناجح ويسهل دخول الفيروس إلى الخلايا الهدف. تم جمع إجمالي 90 عينة دم 50 منها من الأشخاص الذين أصيبوا بفيروس سارس- 2و 40 عينه منها اصحاء غير مصابين بفيروس سارس-2 تتراوح اعمارهم (20-60 سنة) خلال تشرين الاول/2020 الى كانون الثاني/2021 تم فحص جميع المرضى عن طريق RT-PCR بمستشفى مرجان التعليمي . تم جمع عينات الدم من جميع مرضى كوفيد-19 والغير المريضين ، ثم تم استخراج الحمض النووي وتحليله من أجل تحديد جين الإنزيم المحول للأنجيوتنسين (I / D) ، والأنماط الجينية للانترلوكين 4 PCR/RFLP)) وترددات الأليلات بواسطة تفاعل البوليميريز المتسلسل و عن طريق الترحيل الكهربائي المستخدم للفحص. وجدت النتيجة أن ترددات اليل I/D)) للمرضى، والتي وجدت تواترًا للأنماط الجينية DD و ID و II من جين ACE وجدت 42%(21) و 38%(19)و 20%(10) على التوالي. كان تردد اليل 59% D مرة واحدة ، وكذلك تردد اليل I 41%. عرض الترددات من DD و ID و II أيضًا الأنماط الجينية لجين ACE في الغير مريضين تظهر32%(13) ، 25%(10)، 43%(17) وجدوا تردد اليل D حوالي 41% ويمكن أن يكون تردد اليل I 59% ، كما تظهر نتائج IL-4 النمط الجيني تنوع حرج بين الأليلات في المرضى وغير المرضى ، ظهر CC في52.5%(21) مجموعة الاصحاء بينما كان 24%(12) في المرضى ، وكان النمط الوراثي TT أكثر تتابعًا في المرضى 56% (2) من غير المرضى 35%(14). كان التركيب الجيني CT أكثر استمرارية في غير مرضى 12.5%(5) من المرضى 20%(10). تمت دراسة بعض المتغيرات المناعية على مصل 50 مريضاً و 40 غير مريض باستخدام AFIAS… والمقايسة المناعية المرتبطة بالإنزيم (ELISA). وجدت النتيجة مستويات عالية من CRP و Ferritin و D-Dimer و LDH و PCT و IL-4 و IL-6 و IgG و IgM (,25.76mg/L 276.58ng/mL 236.48IU/L, 503.97ng/mL, 299.95pg/mL, 122.89pg/mL, 13.17pg/mL, 12.75, و (1.77ومستويات منخفضة من كريات الدم البيضاء وعدد الحمضات والصفائح الدموية (7.7658Cells/cumm 0.2302Cells/cumm, و 171.68Cells/cumm) على التوالي مقارنة بغير المرضى (1.49mg/L ، 147.61ng/mL ، 222.24ng/mL ، 134.37IU/L ، 226.40pg/mL ، 95.05pg/mL ، 2.07pg/mL ، 0.93 ، 0.08 ، 7.9835Cells/cumm ، 0.3427Cells/cumm و 269.49Cells/cumm ) على التوالي. تم إجراء التحليل الإحصائي باستخدام SPSS و ANOVA و Chi-Square. التمايز الجيني لـفيروس سارس-2 مع التمييز الأليلي عن طريق تفاعل البوليميريز المتسلسل في الوقت الحقيقي ، ووجود الجين S غالبًا في الأيام القليلة الأولى من الإصابة بينما يكون الجين E موجودًا في نهاية وقت الإصابة على مدى 1-2 أسبوع من ظهور العدوى وكذلك الجين N ولكن بدرجة أقل. يكون الجين N أكثر حفظًا واستقرارًا ، مع 90% من تماثل الأحماض الأمينية وطفرات أقل بمرور الوقت. النمط الوراثي D / I في تعدد الأشكال لجين ACE (I/D) المرتبط ببعض تأثيرات المعدية على معدل وفيات مرض كوفيد-19 . أظهر المرضى الذين تلقوا جرعتين من لقاح كورونا الوقائي قبل الإصابة بفيروس سارس-2 أعراضًا خفيفة بدلاً من السكان المصابين حديثًا ، كما زاد مستوى IL-6 في المرضى غير الملقحين مقارنة بالتطعيم والسيطرة ، بينما (IL-4 ، PCT ، IgM و IgG) في المرضى الذين تم تطعيمهم أكثر من غير الملقحين ، مما يشير إلى أن السكان الذين تم تطعيمهم لديهم مناعة أكثر من غير الملقحين. ظهرت نسبة عالية من مرضى كوفيد-19 يعانون من حمى خفيفة وبدون سعال في وقت اجراء الدراسة. انخفاض عدد الصفائح الدموية وزيادة (CRP و Ferritin و D.Dimer و LDH) كمعايير تشخيصية للمرضى المصابين بفيروس سارس-2 ، مع زيادة المعايير المناعية استجابة لعدوى سارس-2 مثل (IL-6 ، IL-4 و PCT و IgG و IgM) نتيجة للدور الوقائي للجهاز المناعي وله مؤشر تنبؤي للمرض والنشاط والعدوى السابقة (التحصين). المرضى الصغار في الفئة العمرية ( 20-29 سنة) هم أكثر نسبة اصابه من البالغين ( 50-59 وكذلك > 60 سنة) بينما لا يوجد اختلاف في عدوى سارس-2 بين المرضى الذكور والإناث. لا توجد فروق في عدد كريات الدم البيضاء وعدد الحمضات في كل من المرضى (في جميع الأعمار) الغير المرضى ، بينما انخفض عدد الصفائح الدموية في (> 60 سنة) مقارنة مع غير المرضى بينما لا توجد فروق في المعايير الدموية بين كل من الذكور والإناث. زيادة CRP و ferritin و D. Dimer و LDH في سن مبكرة (30 -39 سنة وعمر البالغين أكبر من 60 عامًا) وفي كل من الذكور والإناث من مرضى فيروس سارس-2 . زيادة مستوى IL-6 و IL-4 و PCT و IgG و IgM في مرضى كوفيد-19 في جميع الفئات العمرية ، بينما يكون لدى المرضى الذكور مستوى أعلى من الإناث من (IL-6 و IL-4 و PCT و IgG المستوى) ، وانخفاض مستوى الأجسام المضادة IgM نتيجة لارتفاع النشاط المناعي في المرضى الذكور أكثر من الإناث. تم الكشف عن ارتفاع IL-6 في المرضى الذين يعانون من ارتفاع في درجة الحرارة والسعال المعتدل وكذلك المرضى الذين لا يعانون من السعال ، بينما تم زيادة IL-4 و PCT و IgM في المرضى الذين يعانون من حمى خفيفة والمرضى الذين لا يعانون من السعال ، بينما ارتفع IgG في المرضى الذين يعانون من حمى معتدلة وخفيفة و سعال معتدل. IL-6 له علاقة عكسيه مع PCT و IL-4 و IgG و IgM ، بينما IL-4 له علاقة طرديه مع PCT وعلاقة عكسيه مع IgG و IgM. ارتفع PCT مقارنة بالأجسام المضادة IgG لفيروس سارس-2 ، بينما لا توجد علاقة بين PCT والجسم المضاد IgM. تم تنشيط حالة المناعة للمرضى المصابين بفيروس سارس-2 تدريجياً خلال وقت التعرض للعدوى عن طريق ارتفاع IgG بدلاً من IgM.