الجرح : هو كل إصابة، مهما كانت بسيطة، تصيب الجسم أو تؤثر بصحته نتيجة عنف خارجي واقع عليه. ويعرف الجرح طبيا بأنه انقطاع استمرارية الجلد وغيره من انسجة الجسم نتيجة للتعرض لشدة خارجية.
التئام الجروح : هي عملية بيولوجية طبيعية في الجسم البشري. وتشمل العملية أربع مراحل مبرمجة بدقة عالية: تخثر الدم ( الإرقاء)، والالتهاب، نمو الانسجة (الانتشار)، وإعادة البناء. يمكن أن تتداخل العديد من العوامل مع واحد او اكثر من مراحل هذه العملية. مما يتسبب في التئام الجروح بشكل غير لائق او ضعيف.
هدفت هذه الدراسة الى البحث في تأثير كل من مستخلص اوراق نبات الخروع(Ricinus communis) ) الايثانولي و المائي ( ,متفورمين و الفينيتوين لوحدها و مع بعضها في التئام جرح احدث على الخلايا الظهارية المأخوذة من النبيب الكلوي(MDCK).هذه الدراسة تتضمن جزأين:
الجزء الاول: من اجل تحديد سلامة العوامل المختارة)المستخلص الايثانولي و المائي للنبات, متفورمين والفينيتوين( تم اجراء دراسة استطلاعية للتحقيق في سميتها الخلوية على خط الخلايا الطبيعية (MDCK) وفقا لذلك مجموعة من التراكيز تم استخدامها لفحص التئام الجروح.
لفحص السمية الخلوية خط الخلايا الطبيعية (MDCK) قد تم انباتها في طبق زرعي من 96 مكان زرعي وتمت معاملتها بكل نوع من المستخلص الايثانولي والمائي لأوراق نبات الخروع(Ricinus communis) مع مختلف التراكيز(31.25, 62.5, 125, 250,500, 1000) ميكرو غرام/مليلتر
تم اجراء نفس التجربة ولكن بتراكيز مختلفة من المتفورمين (2000, 1000 ,500 ,250 ,125 ,9.62.5,31.25,15.6,7.8,3) ميكرو غرام/مليلتر او الفينيتوين (2000 ,1000 ,500 ,250 ,5.125,62) ميكرو غرام/مليلتر بعد كل ذلك تم حضن جميع الخلايا المعالجة لمدة 24 ساعة عند 37 درجة مئوية. ثم تم اجراء الفحص باستخدام التحليل اللوني للفعالية الحيوية MTT.
الجزء الثاني: تم اجراء جرح عمودي باستخدام micropipette tip200μl بالضغط بقوة على الطبقة الاحادية للخلية في طبق الزرع النسيجي. وبعد ذلك تم تعريض الخلايا المجروحة لمختلف التراكيز لكل عامل مفحوص من الجزء الاول لهذه الدراسة . ست تجارب تم اجراؤها على النحو التالي
التجربة الاولى: تم معاملة خط الخلايا الجريحة (MDCK) مع(500, 250, 125 ,62.5 ,31.25 ,15.6) ميكرو غرام/مليلتر للمستخلص الايثانولي لأوراق نبات الخروع.
التجربة الثانية: تم معاملة خط الخلايا الجريحة (MDCK) مع(500, 250 ,125 ,62.5 ,31.25 ,15.6) ميكرو غرام/مليلتر للمستخلص المائي لأوراق نبات الخروع.
التجربة الثالثة: تم معاملة خط الخلايا الجريحة (MDCK) مع(1000, 500 ,250 ,125 ,62.5 ,31.25,15.6,7.8,3.9) ميكرو غرام/مليلتر للمتفورمين
التجربة الرابعة: تم معاملة خط الخلايا الجريحة (MDCK) مع متفورمين بسلسلة تخافيف (1000,500,250,125) ميكرو غرام/مليلتر بالاشتراك مع 250 او 500 ميكرو غرام/مليلتر للمستخلص الايثانولي لأوراق نبات الخروع.
التجربة الخامسة: : تم معاملة خط الخلايا الجريحة (MDCK) مع(62.5, 31.25 ,15.6 ,7.8 ,3.9,1.9) ميكرو غرام/مليلتر للفينيتوين.
التجربة السادسة: : تم معاملة خط الخلايا الجريحة (MDCK) مع فينيتوين بسلسلة تخافيف (62.5, 31.25 ,15.6 , 7.8, 3.9,1.9) ميكرو غرام/مليلتر بالاشتراك مع 250 او 500 ميكرو غرام/مليلتر للمستخلص الايثانولي لأوراق نبات الخروع.
بعد ذلك تم تصوير منطقة الجرح رقميا كل ثلاث ساعات بدأ من 9 صباحا(hours0 )6,3,12 و9 مساءا على التوالي.
بالمقارنة مع الخلايا التي لم تتعرض للعلاج اظهرت نتائج السمية الخلوية للاستخلاص المائي لأوراق نبات الخروع(Ricinus communis) بتركيز 125ميكرو غرام/مليلتر زيادة معنويا(p≤0.05) في حيوية الخلايا الطبيعية (MDCK) بينما لا يوجد تغير ملحوظ (p>0.05) في حيوية الخلايا للمستخلص الكحولي للنبات.
اظهرت النتائج زيادة معنوية(p≤0.05) في حيوية الخلايا الطبيعية(MDCK) بعد معاملتها بتركيز 62.5 ميكرو غرام/مليلتر لكل من المتفورمين والفينيتوين بينما التركيز العالي للمتفورمين 2000 ميكرو غرام/مليلتر والفينيتوين (2000,1000,500,250) ميكرو غرام/مليلتر اظهرت حيوية الخلايا انخفاضا كبيرا(p<0.001).
بالمقارنة مع الخلايا التي لم تتعرض للعلاج اظهرت النتائج ان كل تراكيز الاستخلاص الايثانولي لأوراق نبات الخروع(Ricinus communis) ماعدا 500 ميكرو غرام/مليلتر انخفاضا كبيرا (p<0.001) في قطر الجرح بينما كل تراكيز الاستخلاص المائي لأوراق نبات الخروع سببت انخفاضا كبيرا (p<0.001) في قطر الجرح مع الشفاء التام.
كما اظهرت النتائج أن جميع تراكيزا لمتفورمين ماعدا(15.6, 31.25 ,62.5) ميكرو غرام/مليلتر وجميع تراكيز الفينيتوين ماعدا أدنى واحد 1.9 ميكرو غرام/مليلتر على التوالي سببت انخفاضا كبيرا (p<0.001) في قطر الجرح مع الشفاء التام.
فيما يتعلق بالتأثير المشترك لمستخلص الايثانول لأوراق نبات الخروع (Ricinus communis) مع المتفورمين أو الفينيتوين اظهرت النتائج أن كلا المجموعتين سببتا انخفاضا كبيرا (p≤0.001) في قطر الجرح .اما التئام الجروح اظهرت النتائج الشفاء الغير التام للجرح الذي تم معالجته مع كل تراكيز المتفورمين مع مستخلص الايثانول لأوراق نبات الخروع ماعدا تركيز 250 ميكرو غرام/مليلتر للنبات مع 125و 250 ميكرو غرام/مليلتر للمتفورمين اظهرت النتائج التئام الجرح كاملا. وكل من تراكيز الفينتوين مع مستخلص الايثانول لأوراق نبات الخروع باستثناء تلك التي تحتوي على 500 ميكرو غرام/مليلتر من المستخلص النباتي مع 62.5 و 31.25 ميكرو غرام/مليلتر للفينتوين سببت التئام الجرح كاملا.
في الختام: مستخلص أوراق نبات الخروع المائي والايثانولي ,المتفورمين والفينتوين تمتلك تاثير الشفاء على خط الخلايا الجريحة (MDCK) افضل من التاثير المشترك ماعدا تاثير فينتوين مع 250ميكروغرام/مليلتر للمستخلص النباتي مما يؤدي الى الشفاء في وقت اسرع.