منصة الرسائل والاطاريح: تصنيع الفضة النانوية باستخدام بعض المستخلصات النباتية وتأثيرها على حيوية طفيلي الاكياس المائية(المشوكة الحبيبية) Echinococcus granulosus

الخلاصة

يمثل مرض الكيس العدارية عبئاً مالياً في العراق لأنه يقلل من إنتاجية الأغنام والماعز والأبقار والإبل من خلال ترك أعضائها المصابة غير صالحة للاستهلاك البشري، مما يتسبب في فقدان الوزن وسوء الحالة الصحية. وهو من أكثر الأمراض حيوانية المصدر انتشارًا بين البشر والحيوانات ويتطور في عدة أعضاء، وأهمها الكبد والرئة ككيس عداري في العديد من العوائل، بما في ذلك البشر. اذ يسبب العديد من المضاعفات التي قد تؤدي إلى الوفاة. ولا توجد الآن أدوية آمنة وفعالة لهذا الطفيل قيد الاستخدام، فالبحث جار لإيجاد مثل هذه العلاجات. خلال الفترة من تشرين الثاني 2021 إلى آيار2022، تم جمع 24 عينة من الأكياس العدارية (14 عينة بشرية و10 عينات من الأغنام). جمعت عينات البشر من محافظة القادسية ومستشفى النجف العامة والخاصة وكذلك مستشفيات محافظات بابل وبغداد والقادسية وتم تخزينها في وسط استزراع كريب رنكر وسوائل الكيس (4: 1) لحين الاستعمال. وللمقارنة، تم عمل عدة تركيزات من ألبيندازول وبعض المستخلصات النباتية المختارة. تلقت مجموعة السيطرة مليلتر واحد من الماء المقطر اما باقي المجاميع زودت بتراكيز المستخلص والدواء المذكور أعلاه في ثلاث مكررات. تم تحديد معدلات صلاحية الرؤيسات الأولية لمدة (0، 24، 48، 72، 96، 120، 144، 168، 192، 216) ساعة وتم تقييم حيويتها باستخدام صبغة إلايوسين في هذا الدراسة، تم إنتاج صبغات طبيعية من Hibiscus sabdarriffa L.، Brassica oleracea L. var. capitata، Beta vulgaris L. and Crocus sativus L.، وتم الحصول على أفضل النتائج من الصبغة الطبيعية المستخرجة من المستخلص النباتي Crocus sativus عند استخدامها لتحديد حيوية الأوالي، اذ أظهرت أن الأوالي الحية كان لها لون أبيض شفاف وتميزت الميتة باللون الأصفر، في حين كانت مصبوغة باللون الأخضر للاوالي الحية والاحمر للميتة عند مقارنتها بصبغة الايوسين القياسية. اختبرت فاعلية المستخلصات النباتية المحددة أعلاه بتركيز (100، 200، 300 مجم / مل) على الرؤيسات الأولية، ومقارنة فعالية المستخلصات النباتية مع علاجات ألبيندازول بتركيز (100، 200، 300) مجم / مل. وتبين ان مستخلص الكجرات له تأثير أفضل من المستخلصات النباتية الأخرى قيد الدراسة وكذلك البيندازول لذلك كان سببا لاختياره لتخليق جزيئات الفضة النانوية منه لاختبار التأثير البيولوجي ضد الطفيلي. خُلقت جزيئات الفضة النانوية من نبات H.sabdarriffa، وتم تقييم فعاليتها ضد الرؤيسات الأولية لـ E.granulosus جنبًا إلى جنب مع العلاج بالألبيندازول في المختبر. واختبر تأثير تراكيز مختلفة من جسيمات النانوية من مستخلص نبات H.sabdarriffa (0.025 ، 0.05، 0.1، 0.2، 0.4، 0.8 ملغم / مل) وعلاقتها بموت الرؤيسات الأولية E.granulosus في فترات زمنية مختلفة في المختبر لـ (0 ، 24 ، 48 ، 72 ، 96 ، 120 ، 144 ، 168 ، 192 ، 216) ساعة. تم فقدان الرؤيسات الأولية ، حيث كانت نسبة الصلاحية في التركيز 0.8 مجم / مل بعد 24 ساعة من العلاج 0٪، مقارنة مع 85.54٪ في معاملة السيطرة. من خلال النتائج الدراسة الحالية لوحظ أن تأثير مستخلص جسيمات H.sabdarriffa النانوية أفضل من علاج البيندازول لأن جسيمات H.sabdarriffa المتناهية في الصغر كان لها القابلية بقتل الأوالي بعد 48 ساعة بتركيز 0.8 ميكروغرام / مل بينما وصل ألبيندازول صفر من الصلاحية بعد 120 ساسعة وبتركيز 300 مجم / مل. لذا كشفت نتائج مستخلص الماء المغلي من جسيمات H.sabdarriffa النانوية فعاليتها ضد حيوية الاوالي ويمكن استخدامها كبديل للعلاج الكيميائي في علاج عدوى الأكياس العدارية. للدراسة الجزيئية، تم اختيار 18 عينة من الأكياس العدارية (9 عينات بشرية و9 عينات من الأغنام) للفحص الجزيئي لتحديد أكثر السلالات المشوكة الحبيبية الشائعة في مقاطعات الفرات الوسطى، وكذلك لدراسة التسلسل الجيني للسلالات، ارسم شجرة النشوء والتطور وقارنها بالسلالات المسجلة في NCBI-BLAST لتحديد السلالات الأكثر شيوعًا للإنسان والأغنام في محافظات الفرات الوسطى. تم استخدام الكبد والرئتين لجمع عينات كيس عداري لهذه الدراسة. عُزل الحمض النووي من الطبقة جرثومية، وتم تضخيم الناتج باستخدام تقنية PCR المتسلسل في الجين 18S rRNA ضمن منطقة Internal Transcribed Spacer ITS1) و (ITS2، الذي له وزن جزيئي (750 و100-1100) أزواج قاعدية. تم مطابقة العينات المدروسة مع العينات المثبتة في بنك الجينات. وجد أن هناك عينات مطابقة لعينات بنك الجينات بنسب مختلفة. الأكياس العدارية البشرية التي اختارت لرسم الشجرة التطورية، حيث كانت النسبة المئوية للمطابقة 99٪ مع عينة تحمل المعرف: KX434757.1 تحت مسمى E.granulosus من الهند والتي تم التعرف عليها من خلال المحاذاة المرسومة لمقارنتها .