منصة الرسائل والاطاريح: التحري عن التأثيرات الجزيئية للأصابة باللشمانيا تروبيكا Leishmania tropica على هيئة الانترلوكينات في الخطوط الخلوية

الخلاصة

خلال الفترة من أكتوبر 2022 إلى يونيو 2023، تم دراسة الطفيلي ونموه، وتنفيذ بعض العناصر التجريبية في المختبر المتقدم لعلم الطفيليات في كلية العلوم ومختبر زرع الأنسجة في كلية الطب / جامعة بابل. الليشمانيا هي مرض يسببه طفيليات البروتوزوا الأولية. يتم نقل هذه الطفيليات إلى البشر عن طريق لدغات الذباب الرملي الأنثوية المصابة. يمكن للطفيلي أن يحفز الجهاز المناعي لإنتاج سايتوكينات التهابية مثل عامل نخر الورم ألفا (TNF-α) وإنترلوكين-1 (IL-1) وإنترلوكين-6 (IL-6) وإنترلوكين-12 (IL-12) وإنترفيرون جاما (IFN-γ). تلعب هذه السايتوكينات دورًا في تنشيط الخلايا المناعية وتعزيز الالتهاب المحلي. بالإضافة إلى ذلك، يمكن لليشمانيا أيضًا أن تحفز إنتاج سايتوكينات مضادة للالتهاب مثل إنترلوكين-10 (IL-10) وعامل تحويل النمو بيتا (TGF-β)، والتي تنظم الاستجابة المناعية وتساعد في تقليل الالتهاب. يمكن أن تختلف استجابة السايتوكينات خلال عدوى الليشمانيا اعتمادًا على نوع الليشمانيا واستجابة الجهاز المناعي للمضيف. في هذه الدراسة، تم أخذ عينات من مريض يشتبه بإصابته بعدوى ليشمانيا في عيادة الأمراض الجلدية في منطقة سنجار بمحافظة الموصل. تم زرع الطفيلي في وسط ثقافة NNN ووسط RBMI 1640. بعد ذلك، تم تحديد الليشمانيا بواسطة تسلسل الحمض النووي والتحديد الجيني. تم تكبير جزء محدد من الحمض النووي بواسطة تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) باستخدام جزء من فحص IS1 و 5.8S rRNA و ITS rRNA في الليشمانيا التروبيكا. تمت تعريض الشرائح المكبَّرة لتجارب تسلسل سانجر مباشرة لتقييم نمط التشابه الجيني في عينات L.tropica. تم بناء شجرة شاملة محددة لتقييم التحديد الجيني الدقيق للمتغيرات المرصودة وتوزيعها الفيلوجيني . وجود متغير واحد لحمض نووي (94-95ACdel) في العينة المدروسة. تشير الشجرة إلى أن العينة المدروسة تحتل نفس الموضع الفيلوجيني داخل تسلسلات ليشمانيا التروبيكا، مع انحراف ملحوظ عن سلالات FN677341.1 و OL413428.1 التي عزلت من مصادر فلسطينية وماليزية على التوالي. ثم يتم تعريض الطفيلي لتراكيز من بنتوستام بتراكيز 2000 و 1500 و 1000 و 500 و 250 و 62.5 µم لتحديد سميته. يتم اصابة cancer cell U937 وماكروفاج الدم البشرية المشتقة من الكريات البيضاء الأولية (MDMs) بالطفيلي مع تراكيز مختلفة من العلاج العلاج القياسي لليشمانيا ثم يتم اعتبار القدرة الحيوية للخلايا والسمية. يتم قياس مستويات الإنترلوكينات (TNF-α و IL-10 و IL-B1 و TGF-B1) ومستوى (MDA و ROS و GPX و TAC) في ماكروفاج cancer cell U937 المشتقة وماكروفاج normal cell (MDMs).شملت الدراسة أيضًا تحليل تأثير ستيبوغلوكونات الصوديوم على إفراز السايتوكينات من الخلايا المناعية. أظهرت النتائج أن ستيبوغلوكونات الصوديوم تتناسب مباشرة مع إفراز السايتوكينات الهامة مثل TNF وتتناسب عكسيا مع IL-10 و IL-B1 و TGF-B1. بشكل عام، تشير الدراسة إلى أن ستيبوغلوكونات الصوديوم لها تأثير سام على الليشمانيا الجلدية وتكبح استجابة الجهاز المناعي. أظهرت نتائج هذه الدراسة انخفاضًا في تركيز إنزيم GPX ومؤشر TAC في الخلايا الطبيعية وكذلك الخلايا السرطانية، ويرجع هذا الانخفاض إلى إنتاج مزيد من أنواع الأكسجين النشط من قبل الخلايا البلعمية. تشير العلاقة العكسية الملاحظة بين مستويات TAC و ROS و MDA ونشاط GPx في الماكروفاج المصابة بالليشمانيا إلى تعطل آليات الدفاع المضادة للأكسدة الطبيعية. قدرة الطفيلي على تعديل استجابة المضيف المناعية والتدخل في الجهاز المضاد للأكسدة يسهم في التوتر الأكسدة وأكسدة الدهون وانخفاض القدرة الكلية للمضادات الأكسدة. يمكن أن تكون هذه التوازنات لها آثار على آلية الإصابة بالليشمانيا الجلدية وقد تؤثر على نتيجة المرض. قد يؤدي الإصابة بالليشمانيا إلى تغييرات في استجابة المناعة وتنشيط الخلايا المناعية المضادة للأورام. استخدام الخلايا الطبيعية من الخلايا العملاقة والخلايا السرطانية يساعد في فهم استجابات المناعة المختلفة ويوفر للباحثين خيارات لمكافحة الليشمانيا. قد تكون للخلايا الطبيعية مقاومة طبيعية أعلى أو قابلية أقل لتأثيرات العلاج المضاد للطفيليات مقارنة بالخلايا السرطانية. يمكن دمج هذه النتائج في تطوير علاجات جديدة للإصابة بالليشمانيا لتعزيز النتائج العلاجية وتقليل مقاومة الدواء وتحسين رعاية المرضى في مكافحة هذا المرض الطفيلي.