تمثل الزوائف الزنجارية متعددة المقاومة للمضادات الحيوية الكائن الممرض التحدي الاول للمستشفيات, حيث اعتبرت منظمة الصحة العالمية الزوائف الزنجارية المقاومة للكاربابينيم كعامل ممرض "حرج" في الحاجة الجوهرية لتصنيع ادوية جديدة من اجل التصدي لاي ازمة صحية وشيكة بسبب مقاومة المضادات الحيوية. تلعب جينات الانتكرون ( وحدات جينية انتقالية) دورا مهما في انتشار المقاومة للمضادات الحيوية للزوائف الزنجارية. تتواجد كاسيتات الجينات التي تشفر لجينات المقاومة للمضادات الحيوية في الصنف الاول من الانتكرون.
جمعت ١٣١عزلة من الزائفة الزنجارية من ٣٨٥ (٣٤٪) عينة سريرية من البول والحروق والجروح وألتهاب الاذن والبلغم, لأفراد من كلا الجنسين وبمختلف الأعمار وتم عزلها من مستشفيات ومختبرات مختلفة في محافظة بابل خلال المدة من شهر شباط ٢٠٢٢ الى شهر تشرين الاول ٢٠٢٢.
عزلت ١٣١ (٣٤.٠٪) عزلة لبكتريا الزائفة الزنجارية من مختلف العينات السريرية وكانت الحروق ١٠٣ (٧٨.٦٣٪) من جميع العينات السريرية وكانت الجروح ٧ (٥.٤٪) و البول ٩ (٦.٨٧٪) والاذن 9 (٦.٨٧٪) والبلغم 3 (2.29٪) وشُخصت من خلال الاختبارات الكيموحيوية الاعتيادية و نظام الفايتك. وتمَّ تأكيدها عن طريق تفاعل البلمرة المتسلسل باستخدام الجين ecfXالخاص بالنوع .
أظهرت النتائج نسب المقاومة للمضادَّات الحيوية تجاه 22 مضادا حيويا كالآتي: كانت جميع عزلات الزوائف الزنجارية مقاومة لكل من المضادات الامبسيلين والسفيكسيم والسيفوتاكسيم بنسبة 131 (١٠٠٪) و يتبعها المضادات سيفيسوكزيم 130(٩٩.٢٣٪) و سيفيبيم123 (٩٣.٩0٪) وتتراسايكلين120) ٩١.٦٠٪) بينما دوكسيسايكلين كانت 119 (٩٠.٨4٪( و سيفوبيرازون 111 (٨٤.٧٣٪) و جنتامايسين 110 (٨٣.٩٧٪) و توبرامايسين و ميروبينيم 107 (٨١.٦٨٪) و تيكارسيلين كلافولانيت 106 (٨٠.٩٪) و اميكاسين 104 (٧٩.٣٩٪) و ببراسلين 102 (٧٧.٨٦٪) و ليفوفلاكساسين 99 (٧٥.٥٧٪) و ازيترونم 97 (٧٤.٠٥٪) و سبروفلوكساسين 96 (٧٣.٢٨٪) و اميبينم 95 (٧2.52٪) و نورفلوكساسين 94 (٧١.٧٥٪) و بيبيراسيلين-تازوباكتم 84 (٦٤.١٢٪) و دوربينم 71) ٥٤.٢٠٪) وكان المضاد ازثرومايسين الاقل نسبة مقاومة 53 (٤٠.٤٦٪).
كانت جميع العزلات متعدِّدة المقاومة للمضادات الحيوية بنسبة (١٠٠٪) على الأقل لثلاث مجاميع من المضادات الحيوية واظهرت بعض العزلات مقاومة لكل المجاميع المستخدمة .
أظهرت النتائج أن نسبة إنتاج إنزيم بيتالاكتميز كانت ٣٣/١٣١(٢٥.١٩٪) من نسبة العزلات المتعدِّدة المقاومة للمضادات الحياتية ، ونسبة إنتاج إنزيمات بيتالاكتميز المعدنية كانت (٣ (٢.٢٩٪) و١٠ (٧.٦٣٪)) من نسبة العزلات المتعدِّدة المقاومة للمضادات الحياتية بطرق (اختبار انتشار القرص المزدوج واشرطة E-test IMI/IMD) على التوالي.
كانت نتائج اختبار تكوين الأغشية الحيوية , من بين ١٣١عزلة من الزوائف الزنجارية ، كانت ١12 عزلة بنسبة (85.50٪) لديها القدرة على تكوين الأغشية الحيوية ، وتم تصنيفها على النحو التالي: 40 (30.53٪) كونت غشاء حيوي قوي و ٥1 (٣٨.93٪) كونت غشاء حيوي متوسط و ٢1 (16.03٪) كونت غشاء حيوي ضعيف ، في حين أن 19 (14.50٪) كانت غير مكونه للغشاء الحيوي. وجد أن المقاومة للمضادات الحيوية أعلى بكثير في عزلات الزائفة الزنجارية المنتجة للغشاء الحيوي مقارنة مع عزلات الزائفة الزنجارية غير المنتجة للغشاء الحيوي ((p <0.05.
تم استخلاص الدنا الكروموسومي والبلازميدي لجميع عزلات بكتريا الزائفة الزنجارية و تم تحديد البلازميد في ٦٣/١٣١ (٤٨٪) من عزلات الزائفة الزنجارية.
أظهرت تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل وجود جين الانتكرون من النوع الاول (intI1) في جميع العزلات (١٠٠٪) محمولا على الدنا الكروموسومي , بينما لم تعط أي عزلة للجين (intI1) محمولا على البلازميد. فيما يتعلق بوجود الجينات المشفرة للصنف2 (intI2) كانت ٥ (٣.٨١٪) محمولا على الدنا الكروموسومي و الصنف 3intI3) ) كانت صفر من العزلات متعددة المقاومة للمضادات الحيوية ، بينما لم يحدد وجود الجين المشفر للانتكرون الصنف2 (intI2) وكانت عزلة موجبة واحدة ناتجة عن الجينات المحمولة على الدنا البلازميدي لجين الانتكرون الثالث (intI3).
اظهر التحليل الإحصائي لهذه الدراسة وجود علاقة معنوية بين وجود جين الانتكرون من الصنف الاول مع المقاومة للمضادات الحيوية المختلفة (p≤ 0.05). أشار تحليل كاسيتات الجين لتضخيم المناطق المتغايرة لانتكرون الصنف الاول في 131 عزلة ، حيث أظهرت كل عزلة منطقة متغايرة واحدة تتراوح في الحجم من ٢٠٠ زوج قاعدي إلى ٨٠٠٠ زوج قاعدي.
أوضحت نتائج الكشف الجزيئي لجينات عوامل الضراوة أن أعلى معدل للجين oprL بين عزلات الزائفة الزنجارية سُجل في ١٣١ (١٠٠٪)، يليه Algو oprI في 129(98.47٪) على التوالي و ١٢٥ (٩٥.٤٢٪) للجين oprD2 من العزلات متعددة المقاومة للمضادات الحيوية. ان تكرار تواجد الجينات المشفرة لانزيمات البيتالاكتميز المعدنية والتي حددت بتقنية تفاعل البلمرة المتسلسل كانت كالاتي: blaIMP-1, blaIMP-2, blaIMP-7, blaIMP-10 , blaIMP-13 , blaIMP-25 , blaVIM-1 , blaVIM-2 , blaNDM , blaGIM-1, blaSIM-2 و blaSPM ثلاث عزلات (٢.3٪) تحتوي على جين blaIMP-2 فقط ، تليها 3 (2.3٪) ، ٦ (٤.٥٨٪) ، ١٢٥ (٩٥.٤٢٪) ، ٧ (٥.٣٤٪) ، و ١٢ (٩.١٦٪). تحمل جينات blaVIM-1 و blaVIM-2 و blaNDM و blaSIM-2 و blaSPM على التوالي على الدنا الكروموسومي ، ولم يحدد وجود جينات إضافية. لكن وجد أن ٩ (١٤.٢٩٪) و ٥ (٧.٩٤٪) و ٨ (١٢.٧٠٪) و ٣ (٤.٧٦٪) و 1(1.59٪) تمتلك جينات bla IMP-7 و blaIMP-13و blaVIM-1 و blaVIM-2 و blaSPMمحمولة على الدنا البلازميدي على التوالي ، بينما لم يتم الكشف عن الجينات الأخرى. من الجدير بالذكر أن جميع عزلات الزائفة الزنجارية البالغ عددها ١٣١ تحتوي على الجين intI1.
النتائج الحالية المتعلقة بتحليل المنطقة المتغايرة ((5'CS للعزلات العشرة المرسلة لتحليل تسلسل النيوكلوتيدات ، اظهرت تشابه و تماثل جيني بالتسلسل بنسبة (99٪) مع تسلسل NCBI BLAST . كما اظهرت دراسة التباين الجيني لجين oprD2 عن وجود طفرات الحذف عند مقارنتها مع تسلسلNCBI BLAST .
تمثل الزوائف الزنجارية متعددة المقاومة للمضادات الحيوية الكائن الممرض التحدي الاول للمستشفيات, حيث اعتبرت منظمة الصحة العالمية الزوائف الزنجارية المقاومة للكاربابينيم كعامل ممرض "حرج" في الحاجة الجوهرية لتصنيع ادوية جديدة من اجل التصدي لاي ازمة صحية وشيكة بسبب مقاومة المضادات الحيوية. تلعب جينات الانتكرون ( وحدات جينية انتقالية) دورا مهما في انتشار المقاومة للمضادات الحيوية للزوائف الزنجارية. تتواجد كاسيتات الجينات التي تشفر لجينات المقاومة للمضادات الحيوية في الصنف الاول من الانتكرون.
جمعت ١٣١عزلة من الزائفة الزنجارية من ٣٨٥ (٣٤٪) عينة سريرية من البول والحروق والجروح وألتهاب الاذن والبلغم, لأفراد من كلا الجنسين وبمختلف الأعمار وتم عزلها من مستشفيات ومختبرات مختلفة في محافظة بابل خلال المدة من شهر شباط ٢٠٢٢ الى شهر تشرين الاول ٢٠٢٢.
عزلت ١٣١ (٣٤.٠٪) عزلة لبكتريا الزائفة الزنجارية من مختلف العينات السريرية وكانت الحروق ١٠٣ (٧٨.٦٣٪) من جميع العينات السريرية وكانت الجروح ٧ (٥.٤٪) و البول ٩ (٦.٨٧٪) والاذن 9 (٦.٨٧٪) والبلغم 3 (2.29٪) وشُخصت من خلال الاختبارات الكيموحيوية الاعتيادية و نظام الفايتك. وتمَّ تأكيدها عن طريق تفاعل البلمرة المتسلسل باستخدام الجين ecfXالخاص بالنوع .
أظهرت النتائج نسب المقاومة للمضادَّات الحيوية تجاه 22 مضادا حيويا كالآتي: كانت جميع عزلات الزوائف الزنجارية مقاومة لكل من المضادات الامبسيلين والسفيكسيم والسيفوتاكسيم بنسبة 131 (١٠٠٪) و يتبعها المضادات سيفيسوكزيم 130(٩٩.٢٣٪) و سيفيبيم123 (٩٣.٩0٪) وتتراسايكلين120) ٩١.٦٠٪) بينما دوكسيسايكلين كانت 119 (٩٠.٨4٪( و سيفوبيرازون 111 (٨٤.٧٣٪) و جنتامايسين 110 (٨٣.٩٧٪) و توبرامايسين و ميروبينيم 107 (٨١.٦٨٪) و تيكارسيلين كلافولانيت 106 (٨٠.٩٪) و اميكاسين 104 (٧٩.٣٩٪) و ببراسلين 102 (٧٧.٨٦٪) و ليفوفلاكساسين 99 (٧٥.٥٧٪) و ازيترونم 97 (٧٤.٠٥٪) و سبروفلوكساسين 96 (٧٣.٢٨٪) و اميبينم 95 (٧2.52٪) و نورفلوكساسين 94 (٧١.٧٥٪) و بيبيراسيلين-تازوباكتم 84 (٦٤.١٢٪) و دوربينم 71) ٥٤.٢٠٪) وكان المضاد ازثرومايسين الاقل نسبة مقاومة 53 (٤٠.٤٦٪).
كانت جميع العزلات متعدِّدة المقاومة للمضادات الحيوية بنسبة (١٠٠٪) على الأقل لثلاث مجاميع من المضادات الحيوية واظهرت بعض العزلات مقاومة لكل المجاميع المستخدمة .
أظهرت النتائج أن نسبة إنتاج إنزيم بيتالاكتميز كانت ٣٣/١٣١(٢٥.١٩٪) من نسبة العزلات المتعدِّدة المقاومة للمضادات الحياتية ، ونسبة إنتاج إنزيمات بيتالاكتميز المعدنية كانت (٣ (٢.٢٩٪) و١٠ (٧.٦٣٪)) من نسبة العزلات المتعدِّدة المقاومة للمضادات الحياتية بطرق (اختبار انتشار القرص المزدوج واشرطة E-test IMI/IMD) على التوالي.
كانت نتائج اختبار تكوين الأغشية الحيوية , من بين ١٣١عزلة من الزوائف الزنجارية ، كانت ١12 عزلة بنسبة (85.50٪) لديها القدرة على تكوين الأغشية الحيوية ، وتم تصنيفها على النحو التالي: 40 (30.53٪) كونت غشاء حيوي قوي و ٥1 (٣٨.93٪) كونت غشاء حيوي متوسط و ٢1 (16.03٪) كونت غشاء حيوي ضعيف ، في حين أن 19 (14.50٪) كانت غير مكونه للغشاء الحيوي. وجد أن المقاومة للمضادات الحيوية أعلى بكثير في عزلات الزائفة الزنجارية المنتجة للغشاء الحيوي مقارنة مع عزلات الزائفة الزنجارية غير المنتجة للغشاء الحيوي ((p <0.05.
تم استخلاص الدنا الكروموسومي والبلازميدي لجميع عزلات بكتريا الزائفة الزنجارية و تم تحديد البلازميد في ٦٣/١٣١ (٤٨٪) من عزلات الزائفة الزنجارية.
أظهرت تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل وجود جين الانتكرون من النوع الاول (intI1) في جميع العزلات (١٠٠٪) محمولا على الدنا الكروموسومي , بينما لم تعط أي عزلة للجين (intI1) محمولا على البلازميد. فيما يتعلق بوجود الجينات المشفرة للصنف2 (intI2) كانت ٥ (٣.٨١٪) محمولا على الدنا الكروموسومي و الصنف 3intI3) ) كانت صفر من العزلات متعددة المقاومة للمضادات الحيوية ، بينما لم يحدد وجود الجين المشفر للانتكرون الصنف2 (intI2) وكانت عزلة موجبة واحدة ناتجة عن الجينات المحمولة على الدنا البلازميدي لجين الانتكرون الثالث (intI3).
اظهر التحليل الإحصائي لهذه الدراسة وجود علاقة معنوية بين وجود جين الانتكرون من الصنف الاول مع المقاومة للمضادات الحيوية المختلفة (p≤ 0.05). أشار تحليل كاسيتات الجين لتضخيم المناطق المتغايرة لانتكرون الصنف الاول في 131 عزلة ، حيث أظهرت كل عزلة منطقة متغايرة واحدة تتراوح في الحجم من ٢٠٠ زوج قاعدي إلى ٨٠٠٠ زوج قاعدي.
أوضحت نتائج الكشف الجزيئي لجينات عوامل الضراوة أن أعلى معدل للجين oprL بين عزلات الزائفة الزنجارية سُجل في ١٣١ (١٠٠٪)، يليه Algو oprI في 129(98.47٪) على التوالي و ١٢٥ (٩٥.٤٢٪) للجين oprD2 من العزلات متعددة المقاومة للمضادات الحيوية. ان تكرار تواجد الجينات المشفرة لانزيمات البيتالاكتميز المعدنية والتي حددت بتقنية تفاعل البلمرة المتسلسل كانت كالاتي: blaIMP-1, blaIMP-2, blaIMP-7, blaIMP-10 , blaIMP-13 , blaIMP-25 , blaVIM-1 , blaVIM-2 , blaNDM , blaGIM-1, blaSIM-2 و blaSPM ثلاث عزلات (٢.3٪) تحتوي على جين blaIMP-2 فقط ، تليها 3 (2.3٪) ، ٦ (٤.٥٨٪) ، ١٢٥ (٩٥.٤٢٪) ، ٧ (٥.٣٤٪) ، و ١٢ (٩.١٦٪). تحمل جينات blaVIM-1 و blaVIM-2 و blaNDM و blaSIM-2 و blaSPM على التوالي على الدنا الكروموسومي ، ولم يحدد وجود جينات إضافية. لكن وجد أن ٩ (١٤.٢٩٪) و ٥ (٧.٩٤٪) و ٨ (١٢.٧٠٪) و ٣ (٤.٧٦٪) و 1(1.59٪) تمتلك جينات bla IMP-7 و blaIMP-13و blaVIM-1 و blaVIM-2 و blaSPMمحمولة على الدنا البلازميدي على التوالي ، بينما لم يتم الكشف عن الجينات الأخرى. من الجدير بالذكر أن جميع عزلات الزائفة الزنجارية البالغ عددها ١٣١ تحتوي على الجين intI1.
النتائج الحالية المتعلقة بتحليل المنطقة المتغايرة ((5'CS للعزلات العشرة المرسلة لتحليل تسلسل النيوكلوتيدات ، اظهرت تشابه و تماثل جيني بالتسلسل بنسبة (99٪) مع تسلسل NCBI BLAST . كما اظهرت دراسة التباين الجيني لجين oprD2 عن وجود طفرات الحذف عند مقارنتها مع تسلسلNCBI BLAST .