منصة الرسائل والاطاريح: تأثير الكيرستين على الاجهاد التأكسدي, موت الخلية المبرمج, الالتهاب, كعامل اضافي للدوكسوروبيسين والكاربوبلاتين: دراسة مختبرية على خلايا القولون والمستقيم SW480 - جامعة بابل
العنوان باللغة الانكليزية
Effect of Quercetin on Oxidative Stress, Apoptosis, Inflammation, as Add on Agent to Doxorubicin and Carboplatin: In Vitro Study on Colorectal SW480 Cells
ا يعد سرطان القولون والمستقيم ثالث أكثر أسباب الوفيات المرتبطة بالسرطان شيوعًا ، مما يدل على أن العلاجات الحالية لا يمكنها القضاء على بعض الخلايا السرطانية بشكل فعال. الكيرسيتين هو أحد مركبات الفلافونويدات المهمة التي لها خصائص مضادة للأكسدة ومحفزة لموت الخلايا السرطانية المبرمج ويمكنه أن يثبط نمو الأورام السرطانية . الدوكسوروبيسين هو عامل مجزء للحمض النووي ينتمي الى عائلة الانثراسيكلين (مضادات حياتية) يستخدم لعلاج مجموعة متنوعة من أمراض السرطان . المعقدات البلاتينية مثل الكربوبلاتين تمنع تضاعف ونسخ الحمض النووي عن طريق توليد مقاربات الحمض النووي لذلك تستخدم لعلاج الكثير من الامراض السرطانية . في الدراسة الحالية في المختبر ، تم تقييم تأثيرات الكيرسيتين والكاربوبلاتين والدوكسوروبيسين ومزيجها على حيوية الخلايا السرطانية والاجهاد التأكسدي وتحريض موت الخلايا المبرمج والتأثير المضاد للالتهاب على خلايا سرطان القولون والمستقيم بعد فترة حضانة دامت 48 ساعة.
تم تنفيذ الجزء العملي للدراسة البحثية الحالية في مختبر أبحاث طلبة الدراسات العليا / قسم علم الأدوية والسموم / كلية الطب / جامعة بابل خلال الفترة من نوفمبر 2022 إلى ابريل 2023.
تم زرع الخلايا الطبيعية في طبق مؤلف من 96 مكان زرعي بمعدل (2 × 104 خلية / حفرة) وتم الحفاظ عليها عند 37 درجة مئوية، وبعد 24 ساعة تم استبدال الاوساط القديمة، وعولجت الخلايا بـ (200,100,50,25,12.5) ميكر مول \ليترمن مادة الكيرستين وذلك لتحديد التراكيز الأمنه على الخلايا الطبيعية. ايضا تم زرع الخلايا السرطانية في طبق مؤلف من 96 مكان زرعي بمعدل (2 × 104 خلية / حفرة) وتم الحفاظ عليها عند 37 درجة مئوية، وبعد 24 ساعة تم استبدال الاوساط القديمة، وعولجت الخلايا بـ (200,100,50,25,12.5) ميكرو مول \ليتر من الكيرستين و(16,8,4,2,1) ميكرو مول \ليتر من الدوكسوروبوسين و (140,70,35,17.5,8.75) ميكرو مول \ليتر من الكاربوبلاتين لقياس تركيز المادة الموافق لتثبيط 50% من الخلايا السرطانية حيث اظهرت النتائج تأثيرا ملحوظا على تثبيط تكاثر الخلايا السرطانية بمستوى يعتمد على تركيز العلاجات المضافة وكان تركيز المادة الموافق لتثبيط 50% من الخلايا السرطانية (185 ,8 و 70) ميكرو مول \ ليتر لكل من الكيرستين, الدوكسوروبيسين و الكاربوبلاتين على التوالي . تراكيز الكيرستين ( 25 و50 ) ميكرو مول\ليتر اظهرت تأثيرا سميا ملحوظا على الخلايا السرطانية دون ان تسبب اي تأثير سمي على الخلايا الطبيعية لذلك تم اختيارها للمزج مع تراكيز العلاجات الكيميائية التي تقتل 50% من الخلايا السرطانية والتي كانت 8 ميكرو مول\ليتر من الدوكسوروبيسين و 70ميكرو مول\ليتر من الكاربوبلاتين لمدة 48 ساعة وتم سحب السوائل الطافية لفحص الاجهاد التأكسدي ,موت الخلايا المبرمج والخاصية المضادة للالتهاب للعلاجات المنفردة والمزدوجة. حيث اظهر العلاج المركب تأثيرا عكسيا اذ ان هذا المزيج قلل من فعالية العلاج الكيميائي ضد الخلايا السرطانية. اما بالنسبة للكاربوبلاتين فان مزج 70 ميكرو مول /ليتر منه مع التركيز القليل جدا من الكيرستين 25 ميكرو مول \ليتر يقلل من فعاليته ضد الخلايا السرطانية اما مزجه مع تركيز 50 ميكرو مول \ليتر من الكيرستين فلا يؤثر على فعاليته ضد الخلايا السرطانية .
يؤدي الكيرستين الى انخفاضا ملحوظا في مستوى الكلوتاثايون في التراكيز العالية فقط عند مقارنته مع المجموعة الغير معرضة للعلاج وكذلك زيادة نسبية ملحوظة بشكل كبير في تركيز المالون دايالديهايد في التراكيز العالية فقط اما علاجات الدوكسوروبيسين والكاربوبلاتين فتقلل وبشكل ملحوظ من الكلوتاثايون حيث كلما زاد تركيزها زاد النقصان في تركيز الكلوتاثايون اما المالوندايالديهايد فيزداد بشكل ملحوظ مع هذه العلاجات كلما زاد تركيزها. على عكس ذلك اظهرت المعالجة المشتركة للكيرستين مع العلاجات الاخرى تأثيرا على مستوى المؤشرات الحيوية للإجهاد التأكسدي ( الكلوتاثايون و المالوندايالديهايد) معاكسا لتأثير الكاربوبلاتين والدوكسوروبوسين عندما تستخدم بشكل منفرد.
أظهرت النتائج زيادة ملحوظة في تركيز الكاسبيز 3 لكل من الكيرسيتين, الدوكسوروبيسين والكاربوبلاتين بشكل يعتمد على التركيز حيث كلما زاد تركيز العلاج زادة مستوى الكاسبيز 3 . اما العلاج المركب فان تركيز 25 ميكرو مول \ليتر من الكيرستين يظهر تأثيرا ضعيفا على مستوى الكاسبيز3 لكلا العقارين اما تركيز 50 ميكرو مول\ليتر من الكيرستين فيظهر تأثيرا عكسيا على مستوى الكاسبيز3 مع الدوكسوروبيسين بينما لا يؤثر على تركيزه مع الكاربوبلاتين.
اظهرت النتائج انخفاضا ملحوظا في تركيز عامل نخر الورم في التراكيز العالية المستخدمة لكل من الكيرستين , الدوكسوروبوسين والكاربوبلاتين حيث كلما زاد تركيز العلاج زاد تأثيره على مستوى عامل نخر الورم بعكس ذلك فان العلاج المركب اظهر تأثيرا معاكسا بدرجات متفاوتة عند مقارنته مع الدوكسوروبيسين والكاربوبلاتين عندما تستخدم بشكل منفرد.
الكيرستين اعطى مفعولا ثنائي الطور حيث انه في التراكيز العالية سلك كعامل محفز للإجهاد التأكسدي وبالتالي حفز موت الخلايا المبرمج اما في التراكيز القليلة فيسلك كعامل مضاد للإجهاد التأكسدي لذلك ادى الاستخدام المزدوج للتراكيز القليلة للكيرستين مع العلاج الكيميائي الى تقليل فعالية العلاج الكيميائي ضد السرطان. تركيز 50 مايكرومول من الكيرستين فقط مع الكاربوبلاتين يقلل الاجهاد التأكسدي للكاربوبلاتين دون ان يأثر على فعاليته السمية ضد الخلايا السرطانية.