منصة الرسائل والاطاريح: ملامح التعبير عن ال micro RNA في باطن عنق الرحم والتنميط الجيني لل Chlamydia trachomatis في النساء المصابات.

الخلاصة

كانت Chlamydia trachomatis تنتمي إلى عائلة Chlamydiaceae، وهي البكتيريا المنقولة جنسيا الأكثر شيوعا والتي تؤدي إلى التهابات الجهاز التناسلي البشري. تصيب Chlamydia trachomatis الخلايا الظهارية العمودية وتسبب عدوى باطن عنق الرحم، والتي تكون بدون أعراض بشكل أساسي. كان مرض التهاب الحوض سببا رئيسيا لكل من العقم البوقي والحمل خارج الرحم. Chlamydia trachomatis هي عامل خطر مهم لمرض التهاب الحوض. تضمن هذا البحث (دراسة حالة - سيطرة) دراسة وتحليل Chlamydia trachomatis وراثيا في المرضى الذين يعانون من مرض التهاب الحوض، والذي تضمن 200 عينة مسحة باطن عنق الرحم تم جمعها من مريضات يعانين من علامات و / أو أعراض مرض التهاب الحوض؛ تم تشخيصهم على أنهم مصابون بمرض التهاب الحوض من قبل طبيب أمراض النساء وكان لديهم عوامل خطر لهذه العدوى. بالإضافة إلى ذلك، تم استخدام 25 عينة مسحة باطن عنق الرحم من الإناث الاصحاء تستخدم كمجموعة سيطرة، والتي استخدمت في الجزء الثاني من هذا العمل. المرضى الذين تم نقلهم إلى العيادات الخارجية لأمراض النساء والتوليد، في مستشفيين في محافظة بابل: مستشفى بابل للولادة والأطفال، ومستشفى الهاشمية التعليمي العام. وكذلك العينات المأخوذة من العيادات الخاصة، خلال الفترة من مارس إلى أغسطس 2022. تم إخضاع جميع العينات البالغ عددها 200 عينة للتشخيص المناعي لداء Chlamydia trachomatis وأعطت 30/200 (15٪) فقط نتائج إيجابية لداء Chlamydia trachomatis مع اختبار مصلي شريطي سريع. خضعت العينات لاستخراج الحمض النووي. تم استخدام الحمض النووي المستخرج من المسحات للكشف الجزيئي عن Chlamydia trachomatis، بين مرضى مرض التهاب الحوض، باستخدام جينات omp التدبير المنزلي (144bp) كعلامات جينية عبر تفاعل البوليميراز المتسلسل التقليدي؛ حيث أعطت نتائج تقريبية 22/200 (11٪). من بين جميع عينات مسحة باطن عنق الرحم التي تم جمعها والبالغ عددها 200 عينة، وجدت هذه الدراسة أن 8/22 (36٪) فقط كانوا يعانون من نزيف بين الوقت مع أعلى نسبة وفقا للمجموعة الأخرى، وكان 5/22 (23٪) يعانون من العقم الأولي والعقم الثانوي، و4/22 (18٪) تعرضوا للإجهاض المتكرر. فقط 100/200 (50٪) من النساء اللواتي تم تشخيصهن من قبل أطباء أمراض النساء على أنهن مصابات بمرض التهاب الحوض مع الفئة العمرية (20-30) وجدن أن 11/22 (50٪) كن إيجابيات Chlamydia trachomatis. 5/11 (45.4٪) كانت إيجابية لل Chlamydia التي كانت تنزف بين الوقت، في حين أن 2/22 (18.1٪) كانت إيجابية لل Chlamydia التي تعاني من العقم الأولي والعقم الثانوي والإجهاض المتكرر. بينما وجدت 100/200 (50٪) من النساء ذوات الفئة العمرية (30-40 سنة) أن 11/22 (50٪) كانت إيجابية لل Chlamydia trachomatis. لوحظ أن العقم الأولي والعقم الثانوي والنزيف بين الوقت كان له نفس المعدل 3/11 (27.2٪) والذي كان له معدل مرتفع في هذا النطاق من العمر، في حين أن الإجهاض المتكرر كان 2/11 (18.1٪). تم استخلاص (22) عينة مسحة باطن عنق الرحم للمريض والتي تعطي نتائج إيجابية لداء Chlamydia trachomatis واستخدامها لدراسة التعبير الجيني للحمض النووي الريبي الميكروي باستخدام طريقة تفاعل البلمرة المتسلسل (∆∆Ct). مستوى التعبير عن جينات microRNA - 142 و520-a في عينة الاختبار وكذلك في عينات السيطرة مع الجينات التأسيسية. تظهر الدراسة أن التعبير عن الجين micro-142 و520-a كان مرتفعا في مرضى Chlamydia trachomatis عند مقارنته بالمجموعة الضابطة، مع زيادة التعبير عن الجين بأكثر من 40٪ و80٪ على التوالي عند مقارنته بالمجموعة الضابطة. أيضا، تم تضخيم 20 عزلة مختبرة فقط من Chlamydia trachomatis بنجاح كعلامات جينية عبر تفاعل البوليميراز المتسلسل التقليدي بحجم1134pbحيث أظهر تحليل تسلسل جين omp1 من العزلات السريرية لل Chlamydia trachomatis والتحليل التطوري لجين omp1 أنه تم فصل Chlamydia trachomatis إلى مجموعتين رئيسيتين (أ وب). انقسمت العنقود (أ) إلى مجموعتين فرعيتين واحتوت على 4 واحتوت هذه المجموعات على 9 عزلات وعزلتين فقط (CT2-CT1) أظهرت تطابقا أو تشابها بنسبة 100٪ بينما تميزت العوازل الأخرى بمسافة وراثية صغيرة مع كل مجموعة. بينما تحتوي المجموعة (ب) على مجموعتين فرعيتين هما 4 مجموعات وتحتوي هذه المجموعات على 11 عزلة لها مسافة وراثية صغيرة أظهر تحليل بيانات التسلسل تباينا في تسلسل ompA وجد أن الطفرة الأكثر استبدالا أظهرت C > T في 18.9612، ثم G > A في 17.3018 تليها A > G في 14.9856 وT > C في 13.5256. اظهرت النتائج في السيليكو لتفاعل البلمرة مع الرفلب لجين omp1 باستخدام إنزيمات Alu1 أنه تم العثور على 9 أنماط وراثية من 20 عزلة سريرية ووفقا لتحليل النشوء والتطور، أظهرت النتائج أن جميع العزلات مجمعة في مجموعتين. احتوت المجموعة (أ) على مجموعتين فرعيتين واحتوت على (15) عزلة. بينما احتوت المجموعة (ب) على (5) عزلات. وفقا للبيانات الواردة في هذا البحث لاحظت الدراسة ان العديد من المؤشرات الحيوية مثل microRNA 142 و520-أ قد تترافق مع القابلية للإصابة بال Chlamydia trachomatis وشدة الامراض التي تسببها Chlamydia trachomatis وتقدمها. كان التنميط الجيني لداء Chlamydia trachomatis مهما لدراسة التسبب في عدوى ال Chlamydia التناسلية ووبئتيها.