منصة الرسائل والاطاريح: تحليل النشوء والتطور لل Acinetobacter baumanniiالمقاومة للتتراسايكلين والمعزولة من عينات سريرية مختلفة

الخلاصة

البكتريا البومانية هي أحد مسببات الأمراض الانتهازية سالبة الجرام ، وتسبب التهابات شديدة يصعب علاجها ، ومقاومة التتراسيكلين بوساطة مضخة التدفق وآلية أخرى تسبب مشاكل ، ويمكن أن تكون مثبطات مضخة التدفق مفيدة. لذلك هدفت هذه الدراسة إلى الكشف المظهري والجيني لمقاومة البكتريا البومانية للتتراسيكلين، والكشف عن مثبطات مضخة التدفق وتوزيع العزلات المقاومة للتتراسيكلين. تضمنت هذه الدراسة مائة وخمسة وعشرين (125) عينة سريرية تم جمعها خلال الفترة الممتدة من بداية تشرين الأول 2022 إلى نهاية كانون الثاني 2023 ، من المرضى الذين حضروا إلى مستشفى الحلة التعليمي العام. تم جمعها من مواقع سريرية مختلفة مثل التهابات المسالك البولية والجهاز التنفسي والحروق والتهابات الجروح. ثم زرعت العينات على اوساط زرعية مختلفة ثم حضنت هوائياً عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة ، وتم تأكيد التشخيص عن طريق الزراعة والاختبارات البيوكيميائية. تم الكشف عن عزلات البكتريا البومانية على أنها 125/23 (18.4٪) موزعة على شكل 23/10 (25٪) عزلات من البلغم ، 23/5 (17.9٪) من الحروق ، بينما 23/4 (16٪) و 23/4 (12.5٪) عزلات كانت من البول والجروح على التوالي. تم إخضاع جميع العزلات البكتيرية لانواع مختلفة من التتراسيكلين (التتراسيكلين ، المينوسكلين، الدوكسيسيكلين والتيجيسيكلين) باختبار الانتشار القرصي والتركيز المثبط الأدنى، وأظهرت النتائج أن أعلى مقاومة ضد المينوسكلين 23/11 (47.8٪) تليها مقاومة التتراسيكلين والدوكسيسيكلين 23/10 (43.5٪) و 23/9 (39٪) على التوالي، والتيجيسيكلين حوالي 23/4 (17.4٪). بالإضافة إلى ذلك ، فيما يتعلق بمؤشر مقاومة المضادات الحيوية المتعددة ؛ أوضحت النتائج أن 23/3 (13٪) مع MAR يساوي 1.0 مما يعني مقاومة لجميع المضادات الحيوية المستخدمة، بينما 23/9 (39٪) مع MAR أكثر من 0.2 والباقي 23/11 (47.8٪) مع حساسية كاملة تجاه جميع المضادات الحيوية (MAR = 0.0). فيما يتعلق بـ MIC ، أظهرت النتائج أن Tigecycline هو العضو الأكثر فاعلية (19/23) ، مع MIC 1 ميكروغرام / مل بنطاق (1 - 0.125 ميكروغرام / مل) ضد هذه العزلات ، بينما أظهرت العزلات المقاومة MIC 8. 16 ميكروجرام / مل. من بين 23 A. baumannii ، 13 عزلة حساسة للتتراسيكلين ، تظهر قيم MIC تتراوح من 2-8 ميكروغرام / مل ، بينما العزلات المقاومة مع نطاق MIC 16-256 ميكروغرام / مل وبشكل رئيسي عند 16-32 ميكروغرام / مل. بالإضافة إلى ذلك ، فيما يتعلق بالدوكسيسيكلين والمينوسكلين أظهر كلاهما نطاق MIC الفعال 1-8 ميكروغرام / مل. فيما يتعلق بالكشف عن مضخة تدفق A. baumannii بواسطة مقايسة عجلة بروميد الإيثيديوم ، 8/10 (80٪) عزلات تعبر عن مضخة تدفق نشطة ؛ 5/8 عند 2 مجم / لتر وأكثر ، ولكن لم تتألق البقية 3/8 حتى عند 2.5 مجم / لتر من EtBr مشابه للتحكم الإيجابي A. baumannii ATCC ، بينما لم تظهر 2/10 (20٪) عزلات نشاط. في وقت لاحق تم استخدام مستخلص البابونج المائي كمضاد للميكروبات ومثبط لمضخة التدفق ، وأظهر أنه مثبط فعال خاصة عند التراكيز الأعلى (40 ، 80 مجم / مل) مع تثبيط لمعظم العزلات المختبرة. الجزء الأخير من هذه الدراسة هو القسم الجيني الذي تضمن اكتشاف جينات مقاومة التتراسيكلين (tetA و tetB و tetM) عن بأستخدام بادئات وعن طريق عملية البلمرة التقليدية. حيث أظهرت نتائج هذه التضخمات أن جين tetA ظهر بين 23/7 فقط (30.4%)؛ بينما فيما يتعلق بجين tetB ظهر بين 23/18 (78.3٪) مع ظهور الجينين معا في اربع عزلات فقط (17.4%) وكانت عزلتين سالبة لكلا الجينين (8.7%). بينما جين حماية الريبوسوم (tetM) كانت جميع العزلات سلبية لهذا الجين. تم تجميع البصمات المتكررة PCR (REP-PCR) لسلالات البكتريا البومانية ، من بين (23) سلالة تم جمعها ، تم تقسيم السلالات الـ 23 إلى مجموعتين رئيسيتين (A و B) ؛ حيث تحتوي المجموعة A على 5 أعضاء ، لم يظهر اثنان منهم أي اختلاف في المسافة مما يشير إلى أنها متطابقة ، وتحتوي على عزلة واحدة مقاومة للتتراسيكلين بمؤشر MAR 0.75. بينما فيما يتعلق بالمجموعة B ، يتم تقسيمها إلى مجموعتين فرعيتين (B1 و B2) وينقسم كل منهما مرة أخرى إلى مجموعتين فرعيتين. المجموعة الفرعية B1 تحتوي على 4 عزلات تم الحصول عليها من مصادر مختلفة وتحتوي بالإضافة إلى ذلك على السلالة المعيارية A. baumannii ATCC، 19606؛ كذلك 4/3 من هذه العزلات أظهرت مقاومة التتراسيكلين المظهرية 2 منهم بمؤشر MAR 0.75 والآخر بمؤشر MAR 1.00 (مقاومة التتراسيكلين الكاملة). المجموعة الفرعية B2 التي تحتوي على 14 ، والتي تم تجميعها في مجموعات فرعية B3 و B4 ، حيث تحتوي B3 على 8 عزلات (تم الحصول على معظمها من البلغم) ، لم تظهر أربعة منها فروقًا في المسافة وتشير إلى التماثل والعلاقة بين هذه العزلات بتوزيع مختلف لمقاومة التتراسيكلين. أخيرًا، فيما يتعلق بالمجموعة الفرعية B4 التي تحتوي على ستة عزلات تم جمعها من مصادر مختلفة. في الختام ، يمكن أن نقول ان REP-PCR يعتبر عملية مناسبة للتحليل الجيني للبكتريا البومانية المقاومة للتتراسيكلين.